[发明专利]一种与大麦啤酒混浊性状相关的InDel分子标记及其应用

说明书

本发明公开了一种与大麦啤酒混浊性状相关的InDel分子标记及其应用，该InDel分子标记基于大麦啤酒混浊基因hazy1编码区起始位点ATG下游70bp处存在的一段6bp缺失所设计；用于鉴定大麦的啤酒混浊性状；所述大麦啤酒混浊基因hazy1编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述6bp缺失的核苷酸序列为CCGCTG。本发明首次公开了一个大麦啤酒混浊性状QTL紧密连锁的InDel分子标记，该分子标记为共显性标记，检测准确高效、扩增方便稳定，可用于分子标记辅助选择，提高不同混浊特性大麦品种的鉴定效率。

技术领域

本发明涉及分子生物学及遗传育种技术领域，尤其涉及一种与大麦啤酒混浊性状相关的InDel分子标记及其应用。

背景技术

大麦(Hordeum vulgare L.)是全球种植面积和产量仅次于玉米、小麦和水稻的第四大谷类作物，其用途广泛，主要用于食品、饲料与啤酒酿造。大麦作为酿造啤酒的主要原料，其品质优劣直接影响啤酒的商品质量及价值。啤酒是一种成分复杂、稳定性不强的胶体溶液，在贮存和运输过程中易发生混浊沉淀。啤酒混浊是一个严重的品质问题，因为它显著缩短啤酒的贮藏时间及货架时间。随着啤酒产业和消费的日益扩大，混浊问题亦日趋突出。因此，解决啤酒混浊问题是保证啤酒品质的重要组成部分。

麦芽作为酿制啤酒的原料，对混浊现象起有十分重要的作用。啤酒生产中发现，大麦原料对啤酒胶体溶液的稳定性和混浊形成有实质性的影响，不同品种的麦芽所酿制的啤酒，混浊度存在差异。因此，可以通过筛选不同啤酒混浊特性的大麦材料，实现对啤酒大麦的育种改良，最大程度地从源头上处理是解决啤酒混浊问题是最经济有效的方法。

一般，很多啤酒公司采用强制老化的方法预测啤酒的货架时间。该方法大致是将啤酒在特定的条件下保存一段时间后检测啤酒的浊度。测试条件一般根据试验目的，模拟市场保存条件而定。但这种测定方法需要时间长，故生产上广泛采用更为快捷的测定方法：即酒精冷混浊试验方法。该法大致步骤是：在待测啤酒样品中添加一定量酒精，于-8℃下冷冻后测定混浊值。一般认为啤酒的冷混浊测定值以20EBC为界限，高于20EBC为高混浊材料，而低于20EBC为低混浊材料。但这些方法均需收集大量的大麦种子，再进行长周期的制麦、制啤等步骤，同时还需加上繁琐的测定分析。因此传统大麦啤酒混浊特性测定分析方法过程繁琐复杂、需要种子量巨大，结果又难以准确可靠。

因此，准确、快速、简单地对大麦啤酒混浊特性进行鉴定，不仅有利于加快优质啤用大麦的相关育种进程，也有利于麦芽、啤酒产业对大麦原料的选择。

发明内容

本发明的目的是提供了一种与大麦啤酒混浊性状相关QTL位点紧密连锁的InDel分子标记，同时提供了该InDel分子标记在筛选大麦啤酒混浊性状中的应用，该分子标记hazy1-InDel，在啤酒生产中可用于筛选不同混浊度的大麦原料，同时在大麦遗传育种领域可用于培育不同混浊度的大麦新品种。

具体技术方案如下：

一种与大麦啤酒混浊性状相关的InDel分子标记，所述InDel分子标记基于大麦啤酒混浊基因hazy1编码区起始位点ATG下游70bp处存在的一段6bp缺失所设计；用于鉴定大麦的啤酒混浊性状；

所述大麦啤酒混浊基因hazy1编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述6bp缺失的核苷酸序列为CCGCTG(SEQ ID NO.4)。

上述InDel分子标记与位于4号长臂端的QTL位点紧密连锁，该QTL位点显著控制大麦啤酒混浊性状，LOD值为4.85，解释约20％的表型变异，结合大麦全基因组序列及注释等信息，锁定位于619905096bp附近的HORVU4Hr1G081640基因为关键的混浊基因，命名为Hazy1基因。

进一步地，本发明根据上述InDel分子标记位点涉及了扩增引物，用于扩增所述InDel分子标记的引物对序列如下所示：