[发明专利]一种与大麦啤酒混浊性状相关的InDel分子标记及其应用

权利要求书

1.一种与大麦啤酒混浊性状相关的InDel分子标记，其特征在于，所述InDel分子标记基于大麦啤酒混浊基因hazy1编码区起始位点ATG下游70bp处存在的一段6bp缺失所设计；用于鉴定大麦的啤酒混浊性状；

所述大麦啤酒混浊基因hazy1编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述6bp缺失的核苷酸序列为CCGCTG。

2.如权利要求1所述的与大麦啤酒混浊性状相关的InDel分子标记，其特征在于，用于扩增所述InDel分子标记的引物对序列，如下所示：

上游引物F为：5’-CCGTCATGGTCTCCGTCTTC-3’；

下游引物R为：5’-AGTGTCCGAGCAGATTGGTC-3’。

3.一种用于扩增权利要求1所述InDel分子标记的引物对，其特征在于，序列如下所示：

上游引物F为：5’-CCGTCATGGTCTCCGTCTTC-3’；

下游引物R为：5’-AGTGTCCGAGCAGATTGGTC-3’。

4.如权利要求3所述的引物对在大麦分子标记辅助育种中的应用。

5.如权利要求3所述的引物对在啤酒生产中筛选不同混浊性状的大麦种质资源的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取待测大麦植株的基因组DNA；

(2)以步骤(1)所述基因组DNA为模板，利用所述引物对进行PCR扩增反应；

(3)检测PCR扩增产物，若扩增产物为90bp的DNA条带，则该待测大麦植株为高啤酒混浊型种质；若扩增产物为96bp的DNA条带，则该待测大麦植株为低啤酒混浊型种质。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，PCR扩增的反应体系50μl体系，包括2×TaqMaster Mix(Dye Plus)25μl，10μmol/L Primer各2μl，100ng/μl模板DNA 2μl，无菌水21μl。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于，PCR扩增的程序包括：95℃预变性3min；95℃变性15s，60℃退火15s，72℃延伸15s，30个循环；72℃延伸5min，4℃保存。

9.如权利要求6所述的应用，其特征在于，采用3％的琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物。