[发明专利]一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒，包括特异性引物对以及探针，其特征在于：

上游引物：ACAATTTCAAACACTGTAAACCTTAAAGCA，

下游引物：Bioten-TCATTCATTTTCCTTTTATCTTCTGATATG，

探针：FITC-TAAAAAGAGACGATATTTACACAGACACAG[THF]ATTTGTAG

GATATGA-C3 Spacer。

2.根据权利要求1所述的一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒，其特征在于，所述下游引物5'端用异硫氰酸荧光素、6-羧基荧光、四乙基罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明、辣根过氧化酶、碱性磷酸酶、荧光基团中的一种进行标记，所述探针5'端用羧基荧光素(FITC)标记，所述中间区域C碱基以及相邻的腺嘌呤脱氧核糖核苷和胞嘧啶脱氧核糖核苷中的一个用[THF]进行替换，所述3'端封闭基因主要包括dideoxy-C(DDC),dideoxy-C(DDG),dideoxy-A(DDA)，dideoxy-T(DDT),C3-spacer,phosphate其他末端封闭基团。

3.根据权利要求2所述的一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括水解缓冲液、双蒸水及醋酸镁。

4.根据权利要求3所述的一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒，其特征在于，所述侧流层析试纸条通过与水解缓冲液和样品的混合物进行接触显色。

5.根据权利要求4所述的一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括核酸提取试剂盒。

6.根据权利要求5所述的一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒，其特征在于，所述PCR扩增试剂为重组酶聚合酶扩增试剂。

7.根据权利要求6所述的一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒，其特征在于，所述重组酶聚合酶扩增试剂包括重组酶、单链结合蛋白和链置换聚合酶。

8.根据权利要求7所述的一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒，其特征在于，所述其他非特异性样本包括虾血细胞虹彩病毒(SHIV)、对虾白斑综合症病毒(WWSV)、急性肝胰腺坏死综合症(EMS)、副溶血弧菌、健康对虾中的任一种。

9.根据权利要求8所述的一种利用RPA-LFS快速检测对虾肝肠胞虫的特异性引物对、检测试剂盒及其应用，其特征在于，所述样本包括水产养殖对虾、养殖环境。