[发明专利]一种靶向病毒的特异性miRNA的获得方法在审
| 申请号： | 202010629582.5 | 申请日： | 2020-07-01 |
| 公开（公告）号： | CN111733157A | 公开（公告）日： | 2020-10-02 |
| 发明（设计）人： | 徐以兵;寿鑫;朱珍芳 | 申请（专利权）人： | 上海嘉慷生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 杭州华宸联名知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 33352 | 代理人： | 黄欢娣 |
| 地址： | 200052 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 靶向 病毒 特异性 mirna 获得 方法 | ||
1.一种靶向病毒的特异性miRNA的获得方法，其特征在于，该方法至少包括：
（1）从激活的NK细胞分泌的外泌体中获得miRNA；
（2）将步骤1获得的miRNA序列和病毒基因组序列进行比对，筛选出具有靶向能力和结合位点的miRNA；
（3）对步骤2筛选得到的miRNA进行分别进行碱基替换，以使其与病毒基因组序列的部分区域完全匹配，从而获得靶向病毒的特异性miRNA。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述病毒为甲型肝炎病毒（NC_001489.1）、乙型肝炎病毒（NC_003977.2）、丙型肝炎病毒（NC_004102.1）、1型艾滋病毒（NC_001802.1）、2型艾滋病毒（NC_001722.1）、人乳头瘤病毒6型（HG793939.1）、人乳头瘤病毒11型（FR872717.1）、人乳头瘤病毒16型（NC_001526.4）、人乳头瘤病毒18型（NC_001357.1）、人乳头瘤病毒31型（J04353.1）、人乳头瘤病毒33型（M12732.1）、人乳头瘤病毒45型（KC470260.1）、人乳头瘤病毒52型（LC373207.1）、人乳头瘤病毒58型（FJ385268.1）、麻疹病毒（NC_001498.1）、狂犬病毒（NC_001542.1）、SARS冠状病毒（NC_004718.3）、埃博拉病毒（NC_006432.1）、新冠病毒COVID-19（MN908947.3）。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2的病毒基因组序列为COVID-19病毒的S蛋白的mRNA序列。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3中，先按照miRNA与病毒基因组序列结合能力进行排序，针对结合能力强的miRNA进行碱基替换。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2的病毒基因组序列为COVID-19病毒的S蛋白的mRNA序列；筛选出的具有靶向能力和结合位点的miRNA至少包括SEQ IDNO.13~ SEQ ID NO.24所示的miRNA；SEQ ID NO.13~ SEQ ID NO.24所示的miRNA经所述碱基替换后，得到的特异性miRNA如SEQ ID NO.1~ SEQ ID NO.12所示。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述激活的NK细胞为经IL-21激活的NK细胞。
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