[发明专利]一种高纯度N-乙酰神经氨酸固体的制备工艺

说明书

本发明涉及一种高纯度N‑乙酰神经氨酸固体的制备工艺，属于N‑乙酰神经氨酸的纯化技术领域，解决传统冰醋酸结晶法制得的N‑乙酰神经氨酸产品纯度达不到99.5％以上、颜色发黄的技术问题。解决方案为：本发明通过工业色谱法制得N‑乙酰神经氨酸粗品溶液，再经过调pH值、浓缩、结晶、溶剂洗涤、干燥，制得N‑乙酰神经氨酸固体的纯度可达到99.5％以上，白度99以上，满足医药上对高纯度N‑乙酰神经氨酸的要求，采用本发明制得N‑乙酰神经氨酸可直接用作标准品使用。

技术领域

本发明属于N-乙酰神经氨酸的纯化技术领域，具体涉及一种高纯度N-乙酰神经氨酸固体的制备工艺。

背景技术

N-乙酰神经氨酸又称唾液酸，是一系列含9个碳原子的羧基化单糖酰化衍生物的统称，其系统命名为5-氨基-3,5-二脱氧-D-甘油-D-半乳壬酮糖。目前N-乙酰神经氨酸的制备方法主要有化学合成法、酶合成法、天然产物提取法和微生物发酵法等。

现有技术中，N-乙酰神经氨酸的纯化常用的方法是冰醋酸结晶法。该法制备N-乙酰神经氨酸收率低，而且杂质脱除不彻底。通过此法得到的精制品，据报道纯度达不到99.5％以上，且颜色发黄，白度在90左右，影响在医药上的推广应用。

工业色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离，实现产品的纯化。

发明内容

为了克服现有技术的不足，解决传统冰醋酸结晶法制得的N-乙酰神经氨酸产品纯度达不到99.5％以上、颜色发黄的技术问题，本发明提供一种高纯度N-乙酰神经氨酸固体的制备工艺。

本发明的设计构思为：采用工业色谱法结合改进的结晶工艺制备N-乙酰神经氨酸。

目前用色谱法只是对唾液酸进行检测，流动相通常使用乙腈、甲醇等物质，本发明通过对色谱法进行创造性改进，把流动相改为pH＝3的乙酸或者磷酸溶液，1.减少了废溶剂的排放，客服了现有色谱的缺点，适合工业化。2.避免了N-乙酰神经氨酸在后续生产过程中颜色加深的问题，利于得到高白度的N-乙酰神经氨酸。3.与唾液酸的结晶溶剂一致，避免了引入新的杂质。

如果只用色谱分离，而没有后续的连续结晶工艺，也无法得到高纯度高白度的N-乙酰神经氨酸的固体。故本发明采用工业色谱和改进结晶相结合的办法。

改进的结晶工艺主要有：浓缩前用食品级氢氧化钠对收集的馏分进行调pH值，调pH的原因是增强唾液酸的稳定性，避免在浓缩的过程中颜色加深导致后续酸洗的难度；第一次溶剂洗涤每加入500升的乙酸加入2升的纯化水，洗涤溶剂中加入纯化水是为了能洗去少量溶于纯化水中的杂质，进一步提高结晶的纯度，这都是制备高纯度高白度的必要技术特征。

本发明通过以下技术方案予以实现。

一种高纯度N-乙酰神经氨酸固体的制备工艺，包括以下步骤：

S1、将N-乙酰神经氨酸水解后进行脱色处理，然后对脱色处理后的N-乙酰神经氨酸进行工业色谱分离，采用色谱仪收集馏分4.5-6.5min的馏分，去除N-乙酰神经氨酸中的杂质分，制得N-乙酰神经氨酸粗品溶液；

所述工业色谱分离的条件如下：

色谱柱：TYS，10um，4.6*250mm，填料3g，

流动相：100％乙酸或者磷酸水溶液，流动相的pH值为3.0；

流速：0.6mL/min；

柱温：室温；

检测波长：210nm；

进样量：200uL/20mg；