[发明专利]一种五指毛桃试管育苗的方法

说明书

本发明提出了一种五指毛桃试管育苗的方法，外植体诱导，选取五指毛桃嫩芽作为外植体，将外植体消毒后，接种于无菌诱导培养基中，在特定的培养条件下进行培养；丛生芽增殖，将生长良好的芽转接入增殖培养基中，在特定的培养条件下进行培养；壮苗，选取2～3cm高的苗，并将其转接入壮苗培养基中，在特定的培养条件下进行培养，得到高4～6cm、直径0.3～0.45mm、节数为3～5节的苗；生根培养，将苗接种于生根培养基中，在特定的培养条件下进行培养；大棚驯化，将生根苗清洗干净，栽种到驯化大棚。可以快速的、不受季节限制的培育五指毛桃苗；培育出的五指毛桃苗不定根多，生根率高，提高其目标产物的产量，单株五指毛桃生长18个月后可产出2.5公斤根。

技术领域

本发明涉及育苗方法，具体为一种五指毛桃试管育苗的方法。

背景技术

五指毛桃为岭南常用草药，以桑科榕属植物粗叶榕的根入药，其性平，味甘、辛，具有健脾补肺、利湿舒筋之功效，用于脾虚浮肿、食少无力、肺痨咳嗽、盗汗、风湿痹痛、产后无乳等症状。此外，五指毛桃又是一食药同源的植物，在广东地区民间用来煲汤。近年来，五指毛桃这一宝贵的植物资源引起了药学工作者的高度重视，对其化学成分、药理活性及其他方面的研究不断深入，并证实补骨脂素为五指毛桃的主要活性成分之一，具有抗菌、抗病毒、抗凝血、抑制肿瘤、免疫调节等作用。

五指毛桃喜好温暖湿润、光照良好的环境，其生长土壤要求肥沃，因此五指毛桃的生长受到季节环境、土地环境的限制，且生根率较低，无法满足五指毛桃根的四季供求。

发明内容

针对背景技术中指出的问题，本发明提出一种五指毛桃试管育苗的方法。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种五指毛桃试管育苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.外植体诱导，选取嫩芽作为外植体，将外植体消毒后，接种于无菌诱导培养基中，其中无菌诱导培养基的成分包括1/2MS、浓度为0.5mg/L的NAA、浓度为50ml/L的土豆汁、浓度为30g/L的白糖和浓度为3.6～4.4g/L的琼脂粉，在温度为25～27℃、光照强度为1500～2000Lx、光照时间为10小时/天的培养条件下，培养50～60天，形成高约0.5cm的芽；

S2.丛生芽增殖，将生长良好的芽转接入增殖培养基中，其中增殖培养基的成分包括MS、浓度为0.3～0.5mg/L的6-BA、浓度为1.0mg/L的NAA、浓度为100ml/L的土豆汁、浓度为30g/L的白糖和浓度为3.6g/L的琼脂粉，每丛3～5株，进行增殖培养，在温度25～27℃,光照强度1800～2000Lx,光照时间10～12小时/天的培养条件下，培养50～60天，增殖率达到3.20以上；

S3.壮苗，选取步骤S2中的2～3cm高的苗，并将其转接入壮苗培养基中，其中壮苗培养基的成分包括1/2MS、浓度为0.5～1.0mg/L的NAA、浓度为20ml/L的土豆汁、浓度为20g/L的白糖和浓度为3.6g/L的琼脂粉，在温度为24～28℃、光照强度为2000～3000Lx、光照时间为11～13小时/天的培养条件下，培养45～60天，得到高4～6cm、直径0.3～0.45mm、节数为3～5节的苗；

S4.生根培养，将步骤S3中的苗接种于生根培养基中，其中生根培养基的成分包括MS、浓度为1.0～2.0mg/L的6-BA、浓度为5％的香蕉泥、浓度为30g/L的白糖和浓度为3.6g/L的琼脂，在温度为24～28℃，光照强度2000～3000Lx,光照时间10～12小时/天的培养条件下，培养30～40天后，植株生新根约1厘米长，培养50天后，植株新根可达到2厘米；

S5.大棚驯化，将步骤S4中的生根苗清洗干净，干净程度达到90％，栽种到驯化大棚；