[发明专利]一种五指毛桃试管育苗的方法

权利要求书

1.一种五指毛桃试管育苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.外植体诱导，选取嫩芽作为外植体，将外植体消毒后，接种于无菌诱导培养基中，其中无菌诱导培养基的成分包括1/2MS、浓度为0.5mg/L的NAA、浓度为50ml/L的土豆汁、浓度为30g/L的白糖和浓度为3.6～4.4g/L的琼脂粉，在温度为25～27℃、光照强度为1500～2000Lx、光照时间为10小时/天的培养条件下，培养50～60天，形成高约0.5cm的芽；

S2.丛生芽增殖，将生长良好的芽转接入增殖培养基中，其中增殖培养基的成分包括MS、浓度为0.3～0.5mg/L的6-BA、浓度为1.0mg/L的NAA、浓度为100ml/L的土豆汁、浓度为30g/L的白糖和浓度为3.6g/L的琼脂粉，每丛3～5株，进行增殖培养，在温度25～27℃,光照强度1800～2000Lx,光照时间10～12小时/天的培养条件下，培养50～60天，增殖率达到3.20以上；

S3.壮苗，选取步骤S2中的2～3cm高的苗，并将其转接入壮苗培养基中，其中壮苗培养基的成分包括1/2MS、浓度为0.5～1.0mg/L的NAA、浓度为20ml/L的土豆汁、浓度为20g/L的白糖和浓度为3.6g/L的琼脂粉，在温度为24～28℃、光照强度为2000～3000Lx、光照时间为11～13小时/天的培养条件下，培养45～60天，得到高4～6cm、直径0.3～0.45mm、节数为3～5节的苗；

S4.生根培养，将步骤S3中的苗接种于生根培养基中，其中生根培养基的成分包括MS、浓度为1.0～2.0mg/L的6-BA、浓度为5％的香蕉泥、浓度为30g/L的白糖和浓度为3.6g/L的琼脂，在温度为24～28℃，光照强度2000～3000Lx,光照时间10～12小时/天的培养条件下，培养30～40天后，植株生新根约1厘米长，培养50天后，植株新根可达到2厘米；

S5.大棚驯化，将步骤S4中的生根苗清洗干净，干净程度达到90％，栽种到驯化大棚。

2.根据权利要求1所述的一种五指毛桃试管育苗的方法，其特征在于，每升1/2MS培养基中含有的组分及各组分的重量如下：825mg的NH4NO3、950mg的KNO3、220mg的CaCl2·2H20、185mg的MgSO4·7H20、85mg的KH2PO4、0.83mg的KI、6.2mg的H3BO3、16.9mg的MnS04·H2O、8.6mg的ZnSO4·7H20、0.25mg的Na2MoO4·2H20、0.025mg的CuSO4·5H20、0.025mg的CoCl2·6H20、27.8mg的FeSO4·7H20、37.3mg的Na2-EDTA、100mg的肌醇、0.5mg的烟酸、0.5mg的盐酸吡哆醇、0.1mg盐酸硫胺素、2mg的甘氨酸。

3.根据权利要求1所述的一种五指毛桃试管育苗的方法，其特征在于，外植体为五指毛桃嫩茎。

4.根据权利要求3所述的一种五指毛桃试管育苗的方法，其特征在于，步骤S1中外植体消毒过程为：将选取好的嫩茎用洗洁精清洗，再用0.1％的升汞浸泡10min，然后用无菌水冲洗5～8次，将消毒后的嫩茎切开，接种到步骤S1中的无菌诱导培养基。

5.根据权利要求1所述的一种五指毛桃试管育苗的方法，其特征在于，步骤S2中丛生芽增值率达到5以上，株高达2～5厘米。

6.根据权利要求3所述的一种五指毛桃试管育苗的方法，其特征在于，步骤S4中壮苗生根培养时，五指毛桃苗株高为3～8厘米，每株不定根有3～5根，且根长1厘米以上。

7.根据权利要求1所述的一种五指毛桃试管育苗的方法，其特征在于，步骤S4中壮苗生根率达到98％以上。

8.根据权利要求1所述的一种五指毛桃试管育苗的方法，其特征在于，步骤S5中生根苗栽种成活率达到95％以上。