[发明专利]一种检测次氯酸/次氯酸钠的荧光探针及制备方法和应用

说明书

本发明属于技术领域，具体涉及一种检测次氯酸/次氯酸钠的荧光探针及制备方法和应用。本发明通过10H‑吩噻嗪与溴乙烷的反应，得到10‑乙基‑10H‑吩噻嗪；通过10‑乙基‑10H‑吩噻嗪进行维尔斯迈尔(Vilsmeier)反应，得到3‑甲酰基10‑乙基‑10H‑吩噻嗪；通过3‑二乙胺基苯酚与3‑甲酰基‑10‑乙基‑10H‑吩噻嗪反应，得到9‑(10‑乙基‑10H‑吩噻嗪)‑3，6‑双(二乙胺基)占吨翁氯化物，即为本发明检测次氯酸/次氯酸钠的荧光探针。本发明的荧光探针用于活细胞内次氯酸/次氯酸钠的检测，将次氯酸/次氯酸钠荧光探针与磷酸缓冲溶液和DMF的缓冲液混合，再加入待测溶液中，得到混合溶液，利用596nm荧光强度的变化检测次氯酸/次氯酸钠的存在与否。

技术领域

本发明属于技术领域，具体涉及一种检测次氯酸/次氯酸钠的荧光探针及制备方法和应用。

背景技术

活性氧(ROS)与多种生理和病理过程密切相关。广泛的研究表明，生物体内活性氧和抗氧化防御系统之间的不平衡会导致氧化应激，这可能会增加癌症的发病率。作为重要的细胞器为机体提供能量，线粒体是细胞活性氧的主要来源，包括过氧化氢(H₂O₂)、超氧阴离子(O^2-)、羟基自由基(·OH)、次氯酸(HClO)等。作为一种重要的生物弱酸性物质，HClO(pK_a＝7.53)在生理pH下部分解离为ClO^-。越来越多的证据表明，HClO/ClO^-在免疫防御中起主导作用。然而，HClO/ClO^-的异常水平可能对人体健康造成危害，导致蛋白质和组织氧化损伤，引起一系列严重的疾病，如帕金森病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默病和其他神经退行性疾病。因此，定量检测细胞内HClO/ClO^-分布的有效方法在生物化学和临床化学中具有重要意义。

发明内容

针对传统用于检测HClO/ClO^-的方法存在会引起待测样品的破会和很难应用于生物体内HClO/ClO^-的检测的技术问题，本发明提供了一种检测次氯酸/次氯酸钠的荧光探针及制备方法和应用。

为了达到上述目的，本发明采用了下列技术方案：

一种快速检测次氯酸/次氯酸钠的荧光探针，其特征在于：9-(10-乙基-10H-吩噻嗪)-3，6-双(二乙胺基)占吨翁氯化物，结构式如式(1)：

2.一种快速检测次氯酸/次氯酸钠的荧光探针的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1，通过10H-吩噻嗪与溴乙烷的反应，得到10-乙基-10H-吩噻嗪；步骤2，通过10-乙基-10H-吩噻嗪进行维尔斯迈尔反应，得到3-甲酰基10-乙基-10H-吩噻嗪；步骤3，通过3-二乙胺基苯酚与3-甲酰基-10-乙基-10H-吩噻嗪反应，得到9-(10-乙基-10H-吩噻嗪)-3，6-双(二乙胺基)占吨翁氯化物，即为次氯酸/次氯酸钠的荧光探针。

3.根据权利要求2所述的一种快速检测次氯酸/次氯酸钠的荧光探针的制备方法，其特征在于：所述步骤1，通过10H-吩噻嗪与溴乙烷的反应，得到10-乙基-10H-吩噻嗪具体方法是：将10H-吩噻嗪与DMF混合并在N₂条件下搅拌至完全溶解，再在30min内缓慢添加NaH，然后缓慢添加1-溴乙烷得到混合物，对混合物进行加热，再倒入冰水中，通过过滤器收集，粗品经硅胶柱层析纯化得到纯白色固体10-乙基-10H-吩噻嗪，结构式如式(2)：