[发明专利]一种时间分辨荧光共振能量转移体系及其应用

权利要求书

1.一种时间分辨荧光共振能量转移体系，其特征在于：

利用带对称羧基和对称氨基的极性稀土配合物荧光分子作为长寿命荧光供体；

高摩尔消光系数、高荧光量子产率的有机荧光小分子作为长寿命荧光受体，构成时间分辨荧光共振能量转移探针配对；

所述的长寿命荧光供体是笼状稀土铕配合物，带有负电荷衍生基团；为方便标记，氨基引入马来酰亚胺和琥珀酰亚胺；加入氟离子，与Eu³⁺形成配位，增强偶极矩、改善荧光；氟离子在反应体系中终浓度350-450mM；

受体分子为Alexa Fluor647或者Dylight 650。

2.权利要求1所述的时间分辨荧光共振能量转移体系用于核酸检测、免疫检测的用途应用，是将荧光供体、荧光受体，分别标记不同的单克隆抗体，通过两两交叉配对，检测不同浓度的待测抗原，从中筛选具备较高分析性能的荧光标记抗体配对；

检测时，激发波长采用中心波长320nm，检测波长采用中心波长620nm和666nm，以665nm和620nm的荧光强度比值，作为信号强度的绝对值，测定一系列已知浓度样本的信号强度的绝对值，通过线性拟合、四参数拟合，建立与待测物的浓度的标准曲线；检测未知样本的信号强度的绝对值，通过标准曲线，获得未知样本的浓度。