[发明专利]用于检测母体血液中胎儿游离DNA β-地中海贫血突变的探针及试剂盒

权利要求书

1.用于检测母体血液中胎儿游离DNA β-地中海贫血突变的探针，其特征在于，包括检测探针和捕获探针；

检测探针的核苷酸序列为：

5'-AACCCATTCAGGTTGATGATTTGACCCCC-3'；

捕获探针的核苷酸序列为：

41-42N位点：5'-GAGGTTTTTTGAGTTT-3'；

41-42M位点：5'-GGTTGAGTTTTTTG-3'；

17N位点：5'-TGTGGGGTAAGGTG-3'；

17M位点：5'-TTTGGTTAGGTGAATG-3'；

654N位点：5'-GTTATTGTTTTAAT-3'；

654M位点：5'-GTTATTATTTTAATT-3'；

71-72N位点：5'-GGTGTTTTTAGTGAT-3'；

71-72M位点：5'-TTTAAGTGATGGTT-3'；

-28N位点：5'-TTGATTTTTATGTTT-3'；

-28M位点：5'-TGATTTTTATGTTT-3'；

βeN位点：5'-GGGTTTTATTATTA-3'；

βeM位点：5'-GGTGGTAAGGTTTT-3'；

31N位点：5'-TAGGTTGTTGGTGG-3'；

31M位点：5'-TTAGGTGTTGGTG-3'；

43M位点：5'-TTTTTTTAGTTTTTTG-3'；

14-15M位点：5'-TTGGTGGGGTAAGG-3'；

IVS1-1N位点：5'-GGGTAGATTGGTAT-3'；

IVS1-1M位点：5'-GGGTAGTTTGGTAT-3'；

IVS1-5M位点：5'-GGTTGTTATTAAGG-3'；

-29M位点：5'-TGATTTTTATGTTT-3'；

CAPM位点：5'-TGGTGTTTGAGGTTG-3'；

INTM位点：5'-ATGTATTTTGGTGT-3'；

27-28M位点：5'-GGTGAGGTTTTT-3'。

2.用于检测母体血液中胎儿游离DNA β-地中海贫血突变的试剂盒，其特征在于，包括：权利要求1所述的检测探针和捕获探针，还包括反应膜条、目的基因扩增试剂、清洗液、孵育液和显色液。

3.根据权利要求2所述的用于检测母体血液中胎儿游离DNA β-地中海贫血突变的试剂盒，其特征在于，目的基因扩增试剂包括Taq DNA聚合酶、10*PCR Buffer、dNTP Mixture、水、引物。

4.根据权利要求3所述的用于检测母体血液中胎儿游离DNA β-地中海贫血突变的试剂盒，其特征在于，引物序列为：

F：5'-AACTACTATTATTTTATAAACATTTTTGTTTTTTTTTT-3'；

R：5'-TTTCAATTAAAATAAATTTTTTTTATTTTTCATAATC-3'。

5.根据权利要求2所述的用于检测母体血液中胎儿游离DNAβ-地中海贫血突变的试剂盒，其特征在于，清洗液为SSC溶液、SDS溶液和蒸馏水混合的混合溶液。

6.根据权利要求5所述的用于检测母体血液中胎儿游离DNAβ-地中海贫血突变的试剂盒，其特征在于，1L清洗液中含有25mL的20×SSC溶液和10mL的10％SDS溶液。

7.根据权利要求2所述的用于检测母体血液中胎儿游离DNA β-地中海贫血突变的试剂盒，其特征在于，孵育液为SSC溶液、SDS溶液、蒸馏水和POD混合的混合溶液。

8.根据权利要求7所述的用于检测母体血液中胎儿游离DNA β-地中海贫血突变的试剂盒，其特征在于，孵育液通过以下方法配制：将100mL的20×SSC溶液和10mL的10％SDS溶液混合，再用蒸馏水定容至1000mL，制得A液，将A液和POD按体积比为2000:1混合，制得孵育液。