[发明专利]一种野山杏果肉黄酮类化合物的测定方法

权利要求书

1.一种野山杏果肉黄酮类化合物的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、溶液的制备

1.1)对照品溶液的配制

称取原花青素、芦丁、柚皮苷二氢查尔酮、槲皮素4种对照品各10.00±0.20mg，用甲醇溶解并分别定容至25mL容量瓶中，摇匀，即得对照品溶液；

1.2)混标储备液

分别取上述步骤1.1)中溶液各2.50mL，混合均匀，制得含有原花青素106.00ug/ml、芦丁103.00ug/ml、柚皮苷二氢查尔酮112.00ug/mL、槲皮素104.00ug/ml的混标储备液；

1.3)混标中间液

准确量取5mL混标溶液甲醇定容至10mL，制得含有原花青素53.00ug/ml、芦丁51.50ug/ml、柚皮苷二氢查尔酮56.00ug/mL、槲皮素52.00ug/ml混标中间液；

1.4)混标标准工作液

分别取0.25、0.50、1.00、2.00mL中间液甲醇定容至10ml容量瓶，摇匀，配制标准工作液上机待测；

1.5)供试品溶液的配制

取1g野山杏干燥果肉，粉碎，过40目筛，加50％乙醇(料液比1:50)，70℃下超声1h，超声提取2次，抽滤，合并滤液旋蒸浓缩后，用甲醇定容至10mL，摇匀，制成供试品溶液，测定前用微孔滤膜(0.22μm)过滤，备用；

步骤2、色谱条件

2.1)检测波长

取上述对照品溶液，采用二极管阵列检测器对各成分吸收峰进行扫描，通过3D图谱对各对照品的吸收峰进行分析，确定对照品溶液的最大吸收波长为273nm；

2.2)流动相

采用甲醇-磷酸水溶液作为流动相；

2.3)流速

在固定相和流动相不变的情况下，流速为0.6-1.2mL/min；

2.4)柱温

在流动相和固定相不变的情况下，柱温为25-35℃；

步骤3数据处理

采用Excel 2010、SigmaPlot 12.0软件进行数据分析。

2.根据权利要求1所述的野山杏果肉黄酮类化合物的测定方法，其特征在于，步骤2中，所述的色谱条件为：Hubble C18，4.6mm×250mm，5μm色谱柱，流动相A甲醇:B0.5％磷酸水溶液＝45:55，以1.0mL/min流速进行等度洗脱，柱温箱的温度为35℃，检测波长为273nm，进样量为10μL。

3.根据权利要求1所述的野山杏果肉黄酮类化合物的测定方法，其特征在于，芦丁、槲皮素、原花青素3种黄酮成分色谱峰在20min内，线性范围为0.52～56μg/mL，r＝0.9998～1，加样回收率为92.13％～96.70％，RSD为0.89％～1.96％。