[发明专利]一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法

权利要求书

1.一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）制备抗海蛇毒血清层析流穿液，包括：获得血浆；胃蛋白酶消化；硫酸铵第一次沉淀；硫酸铵第二次沉淀；板框压滤；明矾吸附；板框压滤；上清液超滤浓缩脱盐；离子交换柱层析；收集层析流穿液；

（2）控制纳米膜过滤的环境温度为20-28℃，将层析流穿液配制成一定浓度、一定处方的溶液，该溶液组成为8-12mM 磷酸盐缓冲液，1.5-4.5g/L 甘氨酸，2-10mM 氯化钠；所述溶液的pH值为6.5-7.5；控制蛋白浓度为20-40g/L；

（3）按照步骤（2）的条件进行纳米膜过滤。

2.根据权利要求1所述的一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，步骤（1）中，所述上清液超滤浓缩脱盐所用超滤溶液为8-12mM 磷酸盐缓冲液，pH值为 6.5-7.5。

3.根据权利要求1所述的一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，步骤（1）中，所述离子交换柱层析采用的层析平衡液为8-12mM 磷酸盐缓冲液，pH值为 6.5-7.5。

4.根据权利要求2或3所述的一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，所述上清液超滤浓缩脱盐所用超滤溶液为9-11mM 磷酸盐缓冲液，pH值为 6.8-7.2；所述离子交换柱层析采用的层析平衡液为9-11mM 磷酸盐缓冲液，pH值为 6.8-7.2。

5.根据权利要求1所述的一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，步骤（1）中，所述胃蛋白酶消化的pH值为3.0-4.0。

6.根据权利要求1所述的一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，步骤（1）中，所述硫酸铵第一次沉淀采用的硫酸铵浓度为3~15%；所述硫酸铵第二次沉淀采用的硫酸铵浓度为20~40%。

7.根据权利要求1所述的一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，步骤（1）中，所述明矾吸附采用的明矾浓度为0.2~10%。

8.根据权利要求1所述的一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，步骤（2）中，所述控制纳米膜过滤的环境温度为21-23℃；所述溶液组成为9-11mM 磷酸盐缓冲液，2-3g/L 甘氨酸，5-8mM 氯化钠；所述溶液的pH值为6.8-7.2；所述控制蛋白浓度为25-35 g/L。

9.根据权利要求1所述的一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，步骤（3）具体为：经0.1微米预过滤器预过滤后，将样品加至纳米膜过滤的容器中，通过氮气控制容器压力3bar，进行纳米膜过滤。

10.根据权利要求1或9所述的一种抗海蛇毒血清纳米膜过滤方法，其特征在于，所述纳米膜过滤采用20nm纳米膜过滤9小时。