[发明专利]一种红葱的组培快繁方法

权利要求书

1.一种红葱的组培快繁方法，其特征在于，该方法为：

S1、外植体的取材与消毒：4月下旬挖取红葱的完整植株，切去全部根毛和植株形态学上端全部葱叶，剥去假茎外部几层叶片，用清水冲洗30min以上，得到外植体初始材料；

S2、茎尖剥离与初代培养：在超净工作台中将S1中得到的外植体初始材料用体积分数为75％的乙醇溶液消毒，再用质量分数为0.1％的升汞溶液进行消毒，用无菌水冲洗后，置于实体解剖镜下剥去外层叶片，当看到一个闪亮半球形组织时，自半球形组织的下端0.5mm处切取带有2～3个叶原基的茎尖分生组织置于初代培养基中封口后培养20d～25d，得到转绿变大的芽点；所述初代培养基由6-BA、NAA、卡拉胶和蔗糖加入至MS培养基并调节pH至5.8而制成，其中初代培养基中6-BA的质量浓度为0.2mg/L，NAA的质量浓度为0.1mg/L，卡拉胶的质量浓度为5g/L，蔗糖的质量浓度为30g/L；

S3、丛生芽诱导和增殖培养:在超净工作台中将S1中得到的转绿变大的芽点置于丛生芽诱导培养基中培养至丛生芽长至约2cm～3cm时，以2个～3个丛生芽为一丛进行分割，转接到增殖培养基中封口后培养20d～25d，得到幼苗；所述丛生芽诱导培养基由6-BA、NAA、卡拉胶和蔗糖加入至MS培养基并调节pH至5.8而制成，其中丛生芽诱导培养基的6-BA的质量浓度为1mg/L、NAA的质量浓度为0.2mg/L，卡拉胶的质量浓度为5g/L，蔗糖的质量浓度为30g/L；所述增殖培养基由6-BA、NAA、卡拉胶和蔗糖加入至MS培养基并调节pH至5.8而制成，其中增殖培养基的6-BA的质量浓度为0.5mg/L、NAA的质量浓度为0.1mg/L、卡拉胶的质量浓度为5g/L，蔗糖的质量浓度为30g/L；

S4、壮苗与生根：在超净工作台中将S3中得到的幼苗转入生根培养基中封口后生根和壮苗培养20d～25d，得到生根苗；所述生根培养基由NAA、卡拉胶和蔗糖加入至1/2MS培养基并调节pH至5.8而制成，其中生根培养基的质量浓度为NAA 0.1mg/L，卡拉胶的质量浓度为5g/L，蔗糖的质量浓度为15g/L；

S5、驯化移栽：去掉封口膜，将S4中得到的丛生苗在散射光下放置2d后，用清水冲洗后，移栽于育苗钵中，培养得到红葱；

S2和S3中每升所述MS培养基中含有以下原料：NH₄NO₃ 1650mg/L、KNO₃ 1900mg/L、CaCl₂·2H₂O 440mg/L、MgSO₄·7H₂O 370mg/L、KH₂PO₄170mg/L、KI 0.83mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、Na₂·MoO₄·2H₂O 0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L、FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L、Na₂·EDTA·2H₂O 37.3mg/L、肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L和甘氨酸2mg/L；

S4中每升所述1/2MS培养基中含有以下原料：NH₄NO₃ 825mg/L、KNO₃ 950mg/L、CaCl₂·2H₂O 220mg/L、MgSO₄·7H₂O 185mg/L、KH₂PO₄85mg/L、KI 0.83mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、Na₂·MoO₄·2H₂O0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L、FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L、Na₂·EDTA·2H₂O 37.3mg/L、肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L和甘氨酸2mg/L。