[发明专利]一种用于食用菌菌丝的活性氧自由基检测方法及其在菌株活力检测的应用在审
申请号: | 202010528633.5 | 申请日: | 2020-06-11 |
公开(公告)号: | CN111693499A | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
发明(设计)人: | 高琪;严冬;荣成博;刘宇;秦鲁明 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;C12Q1/06 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 魏少伟 |
地址: | 100097 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 食用菌 菌丝 活性氧 自由基 检测 方法 及其 菌株 活力 应用 | ||
1.定量检测真菌活性氧自由基的方法,包括:
1)将两种待测真菌样品在探针溶液中分别进行处理,得到两种处理后的样品;所述探针溶液由溶剂与溶质组成,所述溶剂为0.1M PBS,所述溶质及其在所述探针溶液中的浓度为10μM二氯二氢荧光黄双乙酸钠;
2)分别检测两种处理后的样品的荧光信号,荧光信号强的待测真菌样品的活性氧自由基含量高于或候选高于荧光信号弱的待测真菌样品。
2.检测真菌活性氧自由基的方法,包括:
1)将待测真菌样品在探针溶液中进行处理,得到处理后的样品;所述探针溶液由溶剂与溶质组成,所述溶剂为0.1M PBS,所述溶质及其在所述探针溶液中的浓度为10μM二氯二氢荧光黄双乙酸钠;
2)检测所述处理后的样品的荧光信号,如所述处理后的样品发出荧光信号,所述待测真菌样品含有或候选含有活性氧自由基,如所述处理后的样品不发出荧光信号,所述待测真菌样品不含有或候选不含有活性氧自由基。
3.检测真菌活力的方法,包括:
1)将两种待测真菌样品在探针溶液中分别进行处理,得到两种处理后的样品;所述探针溶液由溶剂与溶质组成,所述溶剂为0.1M PBS,所述溶质及其在所述探针溶液中的浓度为10μM二氯二氢荧光黄双乙酸钠;
2)分别检测两种处理后的样品的荧光信号,荧光信号强的待测真菌样品的活力低于或候选低于荧光信号弱的待测真菌样品。
4.检测真菌细胞氧化损伤程度的方法,包括:
1)将两种待测真菌样品在探针溶液中分别进行处理,得到两种处理后的样品;所述探针溶液由溶剂与溶质组成,所述溶剂为0.1M PBS,所述溶质及其在所述探针溶液中的浓度为10μM二氯二氢荧光黄双乙酸钠;
2)分别检测两种处理后的样品的荧光信号,荧光信号强的待测真菌样品的细胞氧化损伤程度高于或候选高于荧光信号弱的待测真菌样品。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:所述待测真菌样品在所述探针溶液中处理的时间大于等于30分钟。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:检测所述处理后的样品的荧光信号时,所述处理后的样品处于所述探针溶液或所述0.1M PBS中。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法,其特征在于:所述真菌为香菇。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:所述待测真菌样品为真菌菌丝。
9.下述任一产品:
X1、一种产品,为权利要求1中所述探针溶液;
X2、成套试剂,由权利要求1中所述探针溶液与激光发射仪器组成;
X3、成套试剂,由权利要求1中所述0.1M PBS与二氯二氢荧光黄双乙酸钠组成;
X4、成套试剂,由权利要求1中所述0.1M PBS、二氯二氢荧光黄双乙酸钠与激光发射仪器组成;
X5、MG培养基:由溶剂和溶质组成,溶剂为水,溶质及其在培养基中的浓度分别为20%麦芽浸粉和10%葡萄糖,%为质量百分比。
10.权利要求9所述产品的下述任一应用:
Y1、检测真菌活性氧自由基;
Y2、定量检测真菌活性氧自由基;
Y3、检测真菌活力;
Y4、检测真菌细胞氧化损伤程度;
Y5、制备检测真菌活性氧自由基产品;
Y6、制备定量检测真菌活性氧自由基产品;
Y7、制备检测真菌活力产品;
Y8、制备检测真菌细胞氧化损伤程度产品;
或,权利要求1或2所述方法在检测真菌活力中的应用;
或,权利要求1或2所述方法在检测真菌细胞氧化损伤程度中的应用;
或,权利要求9中所述MG培养基在培养香菇中的应用。
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