[发明专利]一种稻曲菌素A纯品的制备方法

权利要求书

1.一种稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取稻曲球粉末或稻绿核菌培养物粉末，加入提取液进行超声提取，过滤，收集滤液得到稻曲菌素A粗提取液；

(2)调节稻曲菌素A粗提取液的pH，再采用大孔吸附树脂柱对稻曲菌素A粗提取液进行柱层析，收集洗脱液；

(3)将含有稻曲菌素A的洗脱液旋转蒸发，再用高速逆流色谱分离纯化，收集洗脱液；

(4)将含有稻曲菌素A的洗脱液旋转蒸干，再溶于水中，冷冻干燥，即制得稻曲菌素A纯品。

2.根据权利要求1所述的稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，所述提取液为含有体积分数为1.0％的甲酸和体积分数为0.1％的吐温-20的水溶液。

3.根据权利要求1所述的稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，所述超声提取采用的料液比为1/5-1/20。

4.根据权利要求1所述的稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中调节稻曲菌素A粗提取液的pH至中性。

5.根据权利要求1所述的稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂柱为弱极性大孔吸附树脂柱HZ-801。

6.根据权利要求1所述的稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)进行柱层析时，以2-3BV/h的流速上样至大孔吸附树脂柱。

7.根据权利要求1所述的稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，所述柱层析采用的洗脱液为20％～30％体积分数的甲醇水溶液。

8.根据权利要求7所述的稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中将含有稻曲菌素A的洗脱液旋转蒸发至无甲醇残留。

9.根据权利要求1所述的稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)和(3)中，在收集洗脱液时采用TLC检测洗脱液中稻曲菌素A的含量，所采用的展开剂为体积比为1：1的正丁醇-冰醋酸混合液，显色剂为含有体积分数为1.5％的茚三酮的正丁醇溶液。

10.根据权利要求1所述的稻曲菌素A纯品的制备方法，其特征在于，所述高速逆流色谱采用体积比为正丁醇：水：三氟乙酸＝1:1:0.02的溶剂体系，以上层溶剂为固定相，下层溶剂为流动相，流动相流速为1.0～1.5mL/min，仪器转速为900～1200rpm，运行温度为25℃～40℃。