[发明专利]从动物软骨中提取非变性II型胶原蛋白的制备方法在审
申请号: | 202010527210.1 | 申请日: | 2020-06-11 |
公开(公告)号: | CN111662375A | 公开(公告)日: | 2020-09-15 |
发明(设计)人: | 赵成军;李佳 | 申请(专利权)人: | 湖北和格复合骨胶原生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/78 | 分类号: | C07K14/78;C07K1/14;C07K1/34;C08B37/00 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 吴小明 |
地址: | 434399 湖北省荆州市公安*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 动物 软骨 提取 变性 ii 胶原 蛋白 制备 方法 | ||
1.一种从动物软骨中提取非变性II型胶原蛋白(复合骨胶原)的制备方法,包括如下步骤:
1)浸泡:将动物软骨放入水中浸泡1~4小时;
2)清洗:将步骤1)所得软骨入罐,加水搅拌清洗,除去血水和杂质;
3)超声清洗:将步骤2)所得干净软骨入超声清洗池,按重量比1:1.5的比例加入纯化水进行超声清洗,清洗时间为0.5~1小时,收集洁净软骨;
4)破碎:将步骤3)所得洁净软骨经-20℃~-1℃冷冻后用破碎机切成长度小于1cm的软骨粒;
5)盐溶液浸泡:将步骤4)所得软骨粒与盐溶液按1∶0.1~9的比例(w/w)浸泡处理,浸泡时间为0.5~4小时;
6)过滤:将步骤5)所得溶液进行过滤,除去液体,保留过滤所得固形物;
7)乙醇浸泡:将步骤6)所得固形物中加入乙醇,固形物与乙醇按1∶0.1~30的比例(w/w)投料进行搅拌和浸泡处理,浸泡时间为0.5~4小时,重复2~3次;
8)过滤:待步骤7)完成后,除去乙醇,保留过滤所得固形物;
9)真空干燥:将步骤8)所得固形物入低温真空干燥器,干燥至产品中水分含量小于10%(重量比);
10)涡流粉碎:将步骤9)所得干燥固形物投入到涡流粉碎机中进行粉碎,得到目数大于50目的产品;
11)包装:将步骤10)所得产品过筛、密封包装。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述软骨为陆地哺乳动物软骨、海洋和淡水鱼类软骨或禽类软骨,其为干燥软骨或新鲜软骨。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤3)所述的清洗过程使用超声清洗设备,能够高效的清除油脂和杂质。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤4)所述的洁净软骨经冷冻后用破碎机破碎。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤5)所述的盐溶液选自由以下组成的组:氯化钠溶液、氯化钾溶液、氯化钙溶液或它们的组合,盐溶液的质量浓度为1%~25%。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤7)中使用乙醇浸泡,其质量含量浓度要求大于96%,浸泡使用之后可以进行回收再利用。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤9)中的真空干燥器是能持续监控温度和湿度的干燥设备。
8.通过根据权利要求1-7中任一项所述的制备方法获得的非变性II型胶原蛋白(复合骨胶原),优选其粘多糖含量大于30wt%。
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