[发明专利]一种基于PdCuPt的电化学免疫传感器的制备

说明书

本发明属于新型纳米复合材料、免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种基于PdCuPt的电化学免疫传感器的制备方法。本发明以具有独特双十二面体结构的超小型PdCuPt纳米立方和Fe‑N‑rGO纳米片组装形成的PdCuPt@Fe‑N‑rGO作为电化学信号放大平台，实现了对乙型肝炎病毒表面抗原HBs‑Ag的定量检测，具有特异性强，灵敏度高，检测限低等优点，对乙型肝炎的检测具有重要的科学意义和应用价值。

技术领域

本发明属于新型纳米复合材料、免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种基于PdCuPt的电化学免疫传感器的制备，应用于乙型肝炎病毒表面抗原HBs-Ag的检测。

背景技术

恶性肿瘤具有极高的致死率，在所有疾病中，肿瘤的患病率和致死率都处于前列，严重威胁着世界人民的生命健康。虽然现在科技发展迅速，但当前癌症仍很难治愈，因此快速准确的检测到早期癌症，对于癌症治愈有重要意义。

乙型肝炎病毒感染可引发癌症死亡率第二名的肝癌，尤为受到关注。通过研究确定乙肝病毒感染引起的疾病诊断和预后的可靠肿瘤标志物为乙型肝炎病毒表面抗原HBs-Ag，因而开发灵敏、快速、准确的乙型肝炎病毒表面抗原HBs-Ag检测，对于乙肝病毒的检测具有重要意义。

三金属组成的超小型PdCuPt纳米立方具有独特的双十二面体结构，粒径小，表面积大，与单组分粒子相比，表现出更优的导电性和催化性能，同时PdCuPt纳米立方具有良好的生物相容性，容易与抗体结合，从而实现灵敏、迅速的电化学检测；Fe-N-rGO纳米片具有较大的比表面积，可以有效负载PdCuPt纳米立方，rGO上插入Fe-N使Fe-N-rGO纳米片表现出更优良的导电性和催化性能；PdCuPt纳米立方和Fe-N-rGO纳米片组装形成的PdCuPt@Fe-N-rGO能够进一步地实现信号放大，提高乙型肝炎病毒表面抗原HBs-Ag检测的灵敏度。

本发明以具有独特双十二面体结构的超小型PdCuPt纳米立方和Fe-N-rGO纳米片组装形成的PdCuPt@Fe-N-rGO作为电化学信号放大平台，具有操作简单，特异性强，灵敏度高，检测限低等优点，并且具有良好的重现性、稳定性和选择性，实现对乙型肝炎病毒表面抗原HBs-Ag的超灵敏检测。

发明内容

本发明提供了一种基于PdCuPt的电化学免疫传感器的制备，实现了对乙型肝炎病毒表面抗原HBs-Ag的超灵敏检测。

本发明的目的之一是提供一种基于PdCuPt的电化学免疫传感器的制备方法。

本发明的目的之二是将所制备的一种基于PdCuPt的电化学免疫传感器用于乙型肝炎病毒表面抗原HBs-Ag的检测。

本发明的技术方案，包括以下步骤：

1. 一种基于PdCuPt的电化学免疫传感器的制备，步骤如下：

（1）将直径为3.0 ~ 5.0 mm的玻碳电极用Al₂O₃抛光粉抛光成镜面，在无水乙醇中超声清洗干净；

（2）将6.0 µL、1.0 ~ 2.0 mg/mL的PdCuPt@Fe-N-rGO分散液滴加到电极表面，超纯水冲洗，室温下晾干；

（3）将6.0 µL、5 ~ 15 µg/mL的乙型肝炎病毒表面抗原HBs-Ag抗体滴加到电极表面，pH=7.0磷酸盐缓冲液冲洗电极表面，4.0 ℃冰箱中干燥；

（4）继续将3.0 µL、1 ~ 2 mg/mL的牛血清蛋白溶液滴加到电极表面，用以封闭电极表面上非特异性活性位点，pH=7.0磷酸盐缓冲液冲洗电极表面，4.0 ℃冰箱中晾干；