[发明专利]一种用于检测STR位点的试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 202010517002.3 | 申请日: | 2020-06-09 |
公开(公告)号: | CN111705138A | 公开(公告)日: | 2020-09-25 |
发明(设计)人: | 邵武;董进法;林春美;梁耀极;谢璐;赖宏祉 | 申请(专利权)人: | 辽宁省公安厅;辽宁佰昊生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 北京盛凡智荣知识产权代理有限公司 11616 | 代理人: | 李朦 |
地址: | 110032 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 str 试剂盒 及其 方法 | ||
本发明一种用于检测STR位点的试剂盒及其检测方法,包括如下步骤:步骤一:制备引物组;步骤二:通过步骤一引物组与标准对照单品制备试剂得备用试剂和步骤三:通过步骤二中备用试剂制备试剂盒。本发明属于生物技术领域,具体是一种用于检测STR位点的试剂盒及其检测方法,以缓解现有技术中鉴定STR位点分型时,耗时长、操作繁琐、灵敏度低等的技术问题。
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体是指一种用于检测STR位点的试剂盒及其检测方法。
背景技术
自1985年DNA指纹图谱技术成功地解决了一起涉及移民的亲子鉴定案件以来,DNA分析技术在刑事诉讼中得到了广泛的应用。20年来,人们发现了越来越多具有良好多态性的DNA遗传标记,分析技术随之更加灵敏、快速、简便、精确。至今,世界上已有120多个国家建立并使用DNA实验室以解决刑事案件、民事纠纷以及大型灾难性事件中的尸源认定。目前使用的DNA中的STR位点分型技术为案件的侦破与审判提供了十分有效的科学证据。但这种方法对于人员、成本、仪器及环境有较高的要求,一线检测推广有难度,因此建立一种快速、敏感、简便、经济且易于开展的检测方法显得尤为重要;重组酶等温扩增(RPA)技术可以摆脱传统的PCR仪,可现场在短时间内得到准确的检测结果。RPA是基于重组酶聚合酶介导的扩增原理,模拟体内DNA复制的酶反应过程,对DNA模板进行扩增,可在37℃左右的恒温条件下,30分钟内完成扩增反应。后期结合高分辩率的凝胶电泳分离获得准确基因片断大小来做基因型判断。使用此方法对多重STR位点可对现场痕量样本进行及时扩增,对于法医现场检测有巨大的应用价值。有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
针对上述情况,为克服现有技术的缺陷,本发明提供了一种用于检测STR位点的试剂盒及其检测方法,以缓解现有技术中鉴定STR位点分型时,耗时长、操作繁琐、灵敏度低等的技术问题。
为了达到上述发明目的,本发明一种用于检测STR位点的试剂盒,所述试剂盒通过如下步骤制得:
步骤一:制备引物组;
步骤二:通过步骤一引物组与标准对照单品制备试剂得备用试剂;
步骤三:通过步骤二中备用试剂制备试剂盒。
进一步地,所述步骤一中引物组包括SEQIDNO.1所示单链DNA分子至SEQIDNO.8所示单链DNA分子,所述SEQIDNO.1所示单链DNA分子的名称为vWA-F,所述SEQIDNO.1所示单链DNA分子的序列为GCCCTAGTGGATGATAAGAATAATCAGTATGTG;所述SEQIDNO.2所示单链DNA分子的名称为vWA-R,所述SEQIDNO.2所示单链DNA分子的序列为GGACAGATGATAAATACATAGGATGGATGG;所述SEQIDNO.3所示单链DNA分子的名称为D8S1179-F,所述SEQIDNO.3所示单链DNA分子的序列为ATTGCAACTTATATGTATTTTTGTATTTCATG;所述SEQIDNO.4所示单链DNA分子的名称为D8S1179-R,所述SEQIDNO.4所示单链DNA分子的序列为TTACCAAATTGTGTTCATGAGTATAGTTTC;所述SEQIDNO.5所示单链DNA分子的名称为TPOX-F,所述SEQIDNO.5所示单链DNA分子的序列为GACTGGCACAGAACAGGCACTTAGGGAACC;所述SEQIDNO.6所示单链DNA分子的名称为TPOX-R,所述SEQIDNO.6所示单链DNA分子的序列为AAACGTGAGGTTGACTCTACTGTCCTGGG;所述SEQIDNO.7所示单链DNA分子的名称为FGA-F,所述SEQIDNO.7所示单链DNA分子的序列为TTGAACTCACAGATTAAACTGTAACCAA;所述SEQIDNO.8所示单链DNA分子的名称为FGA-R,所述SEQIDNO.8所示单链DNA分子的序列为GCTGGATATGCTGTACTTTTTCTATGAC。
进一步地,所述步骤一中引物组的终浓度均为0.1~0.2umol/L。
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