[发明专利]一种从含油的藻类或真菌细胞破壁液破乳提油的方法

说明书

本发明公开了一种从含油的藻类或真菌细胞破壁液破乳提取油脂的方法。本发明通过在真空条件下对破壁液进行pH调节、加入适量无机盐、不同时间段的搅拌转速和温度进行调控，实现破壁液的中油、水、蛋白和发酵胞外产物的完全分开，提高藻类和真菌细胞胞内油脂的提取得率85～90％提高到90～96％。使用该方法进行含油乳化液的破乳可以有效避开使用有机溶剂浸提破乳带来的溶剂残留和高温回收溶剂所带来的不饱和脂肪酸的氧化，同时提取后的毛油各项理化指标更低毛油品质更好，实现产品提取过程的绿色无毒无残留。

技术领域

本发明涉及工业微生物发酵和食品、饲料领域，具体涉及一种从含油的藻类或真菌细胞破壁液破乳提油的方法。

背景技术

DHA属于ω-3系列多不饱和脂肪酸(ω-3PUFAs)，是神经系统细胞生长及维持的一种主要物质，同时还是大脑和视网膜的重要构成成分，更是脑细胞增殖和脑沟回形成及视网膜发育必须的营养物质，有利于脑细胞突起的延伸和重新产生，可增强记忆与思维并提高智力，故而有着“脑黄金”的美称。DHA是人体自身难以合成的必需脂肪酸，在大脑皮层中含量高达20％，视网膜中约占50％，对胎婴儿智力和视力发育至关重要，缺乏会导致生长发育迟缓、视力发育不良、皮肤异常鳞屑等症状，甚至可导致不育和智力障碍。DHA还具有重要的生理调节功能和保健作用，能保护视网膜预防近视并改善视力，降低炎症因子的活性并抑制炎症，抗氧化抗衰老并提高机体的免疫能力，减缓细胞凋亡并降低癌症的发病率，抑制血小板聚集并降低血脂浓度，预防并改善心血管的功能等。

DHA在形态上主要有甘油三酯型(TG)、乙酯型(EE)和卵磷脂型(PC-DHA)，而鱼油和藻油来源的DHA为甘油三酯型，其常温下为不溶于水和醇而易溶于醚和烷烃的淡黄色透明液体。海洋藻类是在海洋食物链中脂肪酸的主要生产者，海鱼的DHA归根结底主要来源于海洋藻类。而海洋真菌和细菌同样能合成DHA，例如Thaustochytrium、Schizochytrium、Entomophthora obscyura等，其中破囊壶菌(Thraustochytrium aureum)中的DHA颇为丰富，占到其总脂肪酸含量的34％。目前DHA藻油的主要来源于裂壶藻(Schizochytriumsp.)，吾肯氏壶藻(Ulkenia amoeboida)和寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)，生产时以裂壶藻(或吾肯氏壶藻或寇氏隐甲藻)种为原料，通过发酵、分离、提纯等工艺生产DHA。我国卫生部于2010年下达了关于批准了DHA藻油、ARA油脂等七种物品为新资源食品的公告(2010年3号)。

DHA油脂为藻细胞胞内产物，现有产业化破壁技术有采用机械破壁(如均质机、砂磨机、超声波、研体磨、粉粹机或是高压破壁机等)、化学方法(酸碱破壁等)或是生物酶法(碱性蛋白酶、酸性蛋白酶或是中性蛋白酶)等，但是由于藻细胞内油脂含量比较高且有少量的磷脂，发酵过程会生成大量的胞外多糖，以及细胞破壁后的蛋白碎片，这些主要成分在藻细胞破壁后会形成乳化相溶浆，对油脂提取得率影响非常大。现有专利技术主要采用有机溶剂直接进行破乳(如CN201210030370.0，CN201110111271.0，CN201110313815.1，CN201010136309.5)；采用其他技术与有机溶剂配合进行破乳提取(如采用壳聚糖絮凝有机溶剂提取的CN 201210491610.7，利用短链醇类溶剂和有机溶剂配合提取的CN201110313815.1，利用超声辅助和有机溶剂提取的CN 201310618440.9以及利用酶解和有机溶剂提取的CN 201410273112.4)；以及采用酸碱和表面活性剂调节破乳(如利用酸调剂pH破乳的CN 200810240949.3，利用碱、盐和微波协同作用破乳的CN 201710895535.3，利用表面活性剂进行破乳的CN201110433429.6)。采用有机溶剂破乳时，有机溶剂用量大，毛油成分复杂，同时在脱溶过程对毛油进行加热易使毛油品质变差特别是油脂中的过氧化值和茴香胺值升高，且会造成有机溶剂残留，影响了生产和食用安全性；采用微波协同破乳时能耗高，工艺复杂，生产时间长，产品的质量不佳；采用表面活性剂破乳时，毛油成分复杂，适用范围窄。

发明内容