[发明专利]一种人脐带血来源的外泌体及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种人脐带血来源的外泌体的提取方法，其特征在于，所述外泌体是指脐带血中大小为30-200nm细胞外小囊泡，提取方法包括以下步骤：

(1)将脐带血和预冷的PBS按体积比为1：0.5～3混合，

(2)通过差速离心分离得到初步的外泌体混合物1；

(3)将所述外泌体混合物1加入蔗糖垫溶液，通过密度梯度离心分离得到含有外泌体的蔗糖溶液；

(4)收集所述含有外泌体的蔗糖溶液，转移至截留值至少为100kD超滤管中进行超滤，并通过PBS洗涤截留组分；

(5)收集滤网中的截留组分即为所述人脐带血来源外泌体。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脐带血为正常分娩过程收集得到，处理前存放于含有枸橼酸钠的血液收集袋中。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的差速离心包括如下步骤：250～350g离心10～20分钟；取上清，1800～3000g离心15～25分钟，重复该步骤两次；取上清，9000～15000g离心30～120分钟；取上清，90000～140000g离心30～180分钟。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中的蔗糖垫溶液为包括由下至上如下浓度梯度的蔗糖溶液：2M，1.3M，1.16M，0.8M，0.5M，0.25M。

5.如权利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)的密度梯度离心包括如下步骤：90000～140000g离心2～18小时。

6.如权利要求1～5任一项所述的方法制备的外泌体。

7.如权利要求6所述外泌体在制备抗衰老产品中的用途。

8.如权利要求7所述用途，其特征在于，所述抗衰老产品可用于制备抗内皮细胞衰老和机体衰老的产品。

9.一种抗衰老产品，其特征在于，包括如权利要求6所述的外泌体。

10.如权利要求9所述的抗衰老产品，其特征在于，所述抗衰老产品包括涂抹剂、注射剂和口服剂。