[发明专利]3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙及用其检测呼出气中乙偶姻含量的方法

权利要求书

1.一种3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙，其特征在于，该化合物的结构式如式(I)所示：

2.一种用如权利要求1所述的3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙检测呼出气中乙偶姻含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S01：3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙标准品的制备；

S02：收集人体呼出气，并进行衍生化反应，得到含有乙偶姻-DNPH的待测液；

S03：将步骤S01中的3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙标准品配置成浓度不同的标准品溶液，并用检测仪器对标准溶液进行检测，绘制工作曲线；

S04：将含有乙偶姻-DNPH的待测液用检测仪器进行检测，带入工作曲线，得到人体呼出气中乙偶姻的含量。

3.根据权利要求2所述的一种用3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙检测呼出气中乙偶姻含量的方法，其特征在于，3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙标准品的制备包括如下步骤：

(a)、将2，4-二硝基苯肼加入有机溶剂中溶解，配置成2，4-二硝基苯肼饱和溶液，再往2，4-二硝基苯肼饱和溶液中加入酸性溶液，得到酸性饱和2，4-二硝基苯肼溶液；将3-羟基-2-丁酮加入有机溶剂中溶解，配置成3-羟基-2-丁酮溶液，在恒定的温度下，边搅拌边往酸性饱和2，4-二硝基苯肼溶液中加入3-羟基-2-丁酮溶液；完成反应后，将反应溶剂蒸干得到固体样品；

(b)、利用液相色谱和二极管阵列连用检测器，色谱流动相为100％的乙腈，固体样品用乙腈溶解并过滤，在360nm波长下，进行固体样品中反应物2，4-二硝基苯肼与反应产物的分离；

(c)、将分离后的反应产物溶于有机溶剂中，配置浓度为10ppm的溶液待用，利用液相色谱和二极管阵列连用检测器在200nm-400nm检测10ppm的溶液，利用面积归一化法计算3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙的纯度。

4.根据权利要求3所述的一种用3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙检测呼出气中乙偶姻含量的方法，其特征在于，步骤(a)中，所述3-羟基-2-丁酮与2，4-二硝基苯肼的摩尔比为1：1-3。

5.根据权利要求3所述的一种用3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙检测呼出气中乙偶姻含量的方法，其特征在于，步骤(a)中，酸性饱和2，4-二硝基苯肼溶液中及用来溶解3-羟基-2-丁酮的有机溶剂中均含有0.005％体积分数的氢离子。

6.根据权利要求3所述的一种用3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙检测呼出气中乙偶姻含量的方法，其特征在于，步骤(a)中，酸性饱和2，4-二硝基苯肼溶液放置于60℃的恒温水浴中进行反应；反应时间≥1小时。

7.根据权利要求3所述的一种用3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙检测呼出气中乙偶姻含量的方法，其特征在于，步骤(c)中，分离后的反应产物检测所选波长为254nm、300nm、360nm；所用色谱流动相为乙腈：水＝70％：30％，流速为0.4mL/min。

8.根据权利要求2所述的一种用3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙检测呼出气中乙偶姻含量的方法，其特征在于，步骤S02中，将人体呼出气通入附着有衍生试剂的吸附装置，用洗脱剂洗脱吸附装置，得到待测液；所述的吸附装置为吸附采样管，所述的吸附采样管采用如下步骤制备：

(1)将衍生试剂用乙腈配置成含有衍生试剂的含量为3％的涂渍液；

(2)将固定相填料填充到空白吸附柱上；

(3)将涂渍液涂渍在装填固定相的吸附柱上，最后用氮气吹干，4℃密封冷藏保存；

所述的衍生试剂的化学式为R-NH-NH₂，制备过程中在低醛酮环境中进行，要求以甲醛计≤0.1μg，以丙酮计≤0.25μg。

9.根据权利要求8所述的一种用3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙检测呼出气中乙偶姻含量的方法，其特征在于，所述的衍生试剂为2，4-二硝基苯肼。

10.根据权利要求8所述的一种用3-羟基-2-丁酮-2，4-二硝基苯腙检测呼出气中乙偶姻含量的方法，其特征在于，步骤S02中，对收集的人体呼出气进行加热恒温处理，处理的温度在40-70℃之间，然后以恒定的流速流经吸附装置，再用洗脱剂洗脱吸附装置，过滤得到待测液；人体呼出气流经吸附装置的流速在5-1000mL/min之间。