[发明专利]一种原玻璃蝇节杆菌CDA2-2-2及其产几丁质脱乙酰酶的方法

权利要求书

1.一种原玻璃蝇节杆菌（Arthrobacter protophormiae）CDA2-2-2，其特征在于：该菌株为革兰氏阳性短杆菌，无芽孢，在2216E培养基上生长，菌落呈圆形，黄色半透明，表面湿润，边缘规则，无晕环，中央突起，直径0.1-0.5mm，易挑取；在含有对硝基-N-乙酰苯胺和粉末几丁质的筛选培养基上能够产生黄色透明圈，该菌株氧气、革兰氏染色、明胶水解、接触酶、过氧化氢酶、吲哚试验、葡萄糖发酵均呈阳性，芽孢、鞭毛染色、淀粉水解、硝酸盐还原、产H2S均为阴性，所述原玻璃蝇节杆菌（Arthrobacter protophormiae）CDA2-2-2于2018年12月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNO. 16932，其16S rDNA序列的GenBank登录号为MH978647。

2.一种如权利要求1所述原玻璃蝇节杆菌（Arthrobacter protophormiae）CDA2-2-2产几丁质脱乙酰酶的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）制备种子培养基和发酵培养基；

（2）将原玻璃蝇节杆菌CDA2-2-2接种至种子培养基中进行培养，获取种子液；

（3）将种子液以3%的接种量接种于发酵培养基中，培养获取几丁质脱乙酰酶。

3.根据权利要求2所述的原玻璃蝇节杆菌（Arthrobacter protophormiae）CDA2-2-2产几丁质脱乙酰酶的方法，其特征在于：所述种子培养基采用陈海水配置，pH为7.0，其成分还包括酵母粉0.1%，蛋白胨0.5%。

4.根据权利要求2所述的原玻璃蝇节杆菌（Arthrobacter protophormiae）CDA2-2-2产几丁质脱乙酰酶的方法，其特征在于：所述发酵培养基采用陈海水配置，pH为7.0，其成分还包括几丁质0.5%，酵母粉1%，葡萄糖0.5%，MgSO₄ 0.01%，K₂HPO₄ 0.1%，KH₂PO₄ 0.03%。

5.根据权利要求2所述的原玻璃蝇节杆菌（Arthrobacter protophormiae）CDA2-2-2产几丁质脱乙酰酶的方法，其特征在于：所述步骤（2）中装液量30%，在180rpm、30℃条件下培养24h。

6.根据权利要求2所述的原玻璃蝇节杆菌（Arthrobacter protophormiae）CDA2-2-2产几丁质脱乙酰酶的方法，其特征在于：所述步骤（3）中在140rpm、30℃条件下培养48h，培养完成后以12000×g、4℃条件下离心10min，获取几丁质脱乙酰酶粗液。