[发明专利]抗CEA抗体及其应用、可分泌抗CEA抗体的细胞及其制备方法

权利要求书

1.一种抗CEA抗体，其特征在于，包括：

第一结构域，包括第一轻链可变区和第一重链可变区，所述第一轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述第一重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；及

第二结构域，包括第二轻链可变区和第二重链可变区，所述第二轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示，所述第二重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

2.根据权利要求1所述的抗CEA抗体，其特征在于，所述第一结构域还包括连接的第一轻链恒定区和第一重链恒定区，所述第一轻链恒定区和所述第一重链恒定区分别与所述第一轻链可变区和所述第一重链可变区连接，所述第二结构域还包括连接的第二轻链恒定区和第二重链恒定区，所述第二轻链恒定区和所述第二重链恒定区分别与所述第二轻链可变区和所述第二重链可变区连接，所述第二重链恒定区与所述第一重链恒定区连接。

3.根据权利要求2所述的抗CEA抗体，其特征在于，所述第一轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示，所述第二轻链恒定区的氨基酸序列与所述第一轻链恒定区的氨基酸序列相同，所述第一重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID No.10所示，所述第二重链恒定区的氨基酸序列与所述第一重链恒定区的氨基酸序列相同。

4.根据权利要求3所述的抗CEA抗体，其特征在于，所述第一轻链恒定区的编码序列如SEQ ID No.11所示，所述第二轻链恒定区的编码序列与所述第一轻链恒定区的编码序列相同，所述第一重链恒定区的编码序列如SEQ ID No.12所示，所述第二重链恒定区的编码序列与所述第一重链恒定区的编码序列相同。

5.一种可分泌抗CEA抗体的细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

采用转染组合物转染动物细胞，培养，得到可分泌抗CEA抗体的细胞，其中，转染组合物包括第一质粒、第二质粒和转染试剂，所述第一质粒含有第一轻链可变区的编码序列和第一重链可变区的编码序列，所述第一轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述第一重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述第二质粒含有第二轻链可变区的编码序列和第二重链可变区的编码序列，所述第二轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示，所述第二重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

6.根据权利要求5所述的可分泌抗CEA抗体的细胞的制备方法，其特征在于，所述采用转染组合物转染动物细胞的步骤之前，还包括制备所述第一质粒的步骤：将所述第一轻链可变区的编码序列和所述第一重链可变区的编码序列克隆至pAc-κ-CH3andpAc-λ-CH3质粒中，得到第一质粒，其中，所述第一轻链可变区的编码序列如SEQ ID No.5所示，所述第一重链可变区的编码序列如SEQ ID No.6所示。

7.根据权利要求6所述的可分泌抗CEA抗体的细胞的制备方法，其特征在于，在将所述第一轻链可变区的编码序列和所述第一重链可变区的编码序列克隆至pAc-κ-CH3andpAc-λ-CH3质粒中的步骤之前，还包括如下步骤：采用序列如SEQ ID No.13～SEQ ID No.14所示的引物对扩增所述第一轻链可变区的编码序列；及采用序列如SEQ ID No.15～SEQ IDNo.16所示的引物对扩增所述第一重链可变区的编码序列。

8.根据权利要求5所述的可分泌抗CEA抗体的细胞的制备方法，其特征在于，所述采用转染组合物转染动物细胞的步骤之前，还包括制备所述第二质粒的步骤：将所述第二轻链可变区的编码序列和所述第二重链可变区的编码序列克隆至pAc-κ-CH3andpAc-λ-CH3质粒中，得到第二质粒，所述第二轻链可变区的编码序列如SEQ ID No.7所示，所述第二重链可变区的编码序列如SEQ ID No.8所示。