[发明专利]用于分离红细胞的免疫磁珠及其制备方法和应用在审
| 申请号: | 202010490280.4 | 申请日: | 2020-06-02 |
| 公开(公告)号: | CN111662869A | 公开(公告)日: | 2020-09-15 |
| 发明(设计)人: | 张军;李海燕;徐学晗;宁妍;郭海鹏 | 申请(专利权)人: | 北京康思润业生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078;G01N33/543 |
| 代理公司: | 北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙) 11348 | 代理人: | 张晓萍;刘铁生 |
| 地址: | 101300 北京市顺义*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 分离 红细胞 免疫 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法,其特征在于,包括:
步骤S1、用活化剂对磁珠进行活化,所述磁珠与活化剂的重量比例为1:0.1-5;所述活化的时间为5-30min;
步骤S2、将抗红细胞抗体加入步骤S1得到的活化产物中,进行超声处理;
步骤S3、将封闭剂加入步骤S2得到的产物中进行封闭,强磁分离,得到用于分离红细胞的免疫磁珠。
2.根据权利要求1所述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法,其特征在于,所述的磁珠为包覆有四氧化三铁或三氧化二铁的微球,其表面带有羧基、氨基或羟基。
3.根据权利要求2所述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法,其特征在于,所述的磁珠为包裹有四氧化三铁的聚苯乙烯微球。
4.根据权利要求1所述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法,其特征在于,所述的磁珠的粒径为1-5μm。
5.根据权利要求1所述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法,其特征在于,所述的活化剂包括1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、戊二醛、过碘酸盐和氯胺-T中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法,其特征在于,步骤S2中,所述的抗红细胞抗体与磁珠的质量比为:1:10-1000。
7.根据权利要求1所述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法,其特征在于,步骤S3中,所述封闭剂选自1-5wt%牛血清白蛋白溶液、0.1-5wt%酪蛋白溶液和10-50mM甘氨酸中的至少一种。
8.根据权利要求1所述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法,其特征在于,所述步骤S3还包括:
将得到的用于分离红细胞的免疫磁珠进行清洗,加入保存液中,分散均匀后,按照所需的量分成小份,进行真空干燥,所述保存液为50mM的三羟甲基氨基甲烷和0.5wt%的牛血清白蛋白,所述保存液的pH值为7.8。
9.根据权利要求8所述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法,其特征在于,所述的真空干燥包括:将所述的免疫磁珠在压力为10-30Pa、温度低于-30℃下进行真空冷冻干燥处理。
10.一种用于分离红细胞的免疫磁珠,其特征在于,所述的免疫磁珠是由权利要求1-9中任一项所述的制备方法制备得到。
11.一种权利要求10所述的免疫磁珠在分离血浆中的红细胞的应用。
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