[发明专利]用于分离红细胞的免疫磁珠及其制备方法和应用

说明书

本发明是关于一种用于分离红细胞的免疫磁珠及其制备方法和应用，涉及免疫磁珠制备技术领域。该免疫磁珠的制备方法包括：步骤S1、用活化剂对磁珠进行活化，所述磁珠与活化剂的重量比例为1:0.1‑5；所述活化的时间为5‑30min；步骤S2、将抗红细胞抗体加入步骤S1得到的活化产物中，进行超声处理；步骤S3、将封闭剂加入步骤S2得到的产物中进行封闭，强磁分离，得到用于分离红细胞的免疫磁珠。本发明方法得到的免疫磁珠用于分离血浆中的红细胞，可以在1‑2min内完成血细胞的分离，节约时间，为快速检测提供基础，同时避免了因离心等因素导致的溶血现象，从而提高了检测结果的准确性。

技术领域

本发明属于免疫磁珠制备技术领域，特别是涉及一种用于分离红细胞的免疫磁珠及其制备方法和应用。

背景技术

免疫磁珠分选法(Immunomagnetic separation，IMS)是近年来兴起的一种用于细胞分选的方法，它是在磁珠表面包被具免疫反应性的抗体进行抗原-抗体反应，在细胞表面形成“抗原-抗体-磁珠”免疫复合物。这些结合了磁珠的细胞一旦置于强大的磁场下，就会定向移动，使免疫复合物与其他未被结合的细胞分群。当具超顺磁性的磁珠脱离磁场后，磁性立即消失，从而达到阳性或阴性选择特定细胞的目的。

临床检查中的血液成分的检查需要将全血中的血清或血浆与含血球的成分予以分离。在临床上，目前常用的血浆分离法为通过离心或者静置将红细胞、白细胞、血小板与血浆分开。但是红细胞会干扰常规试剂盒中免疫磁珠捕获抗原，同时红细胞的破裂会造成大量的血红蛋白、高浓度离子或酶释放引起测量误差，从而降低了标本检测的准确性。

在传统分离方法中，静置分离耗时过长；离心操作不当时可能会造成血细胞的破裂，不利于快速检测。与此同时，某些项目的分子标志物半衰期较短，快速分离血细胞进行检测可以更加真实准确的反映血浆中待测分子的含量；在心肌梗塞患者中，快速准确的结果更有利于为患者争取宝贵的时间，以便在第一时间内进行有效的治疗。

发明内容

本发明的主要目的在于，提供一种用于分离红细胞的免疫磁珠及其制备方法和应用，所要解决的技术问题是现有分离方法存在静置分离耗时过长，离心操作不当会造成血细胞的破裂，不利于快速检测。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。依据本发明提出的一种用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法，其包括：

步骤S1、用活化剂对磁珠进行活化，所述磁珠与活化剂的重量比例为1:0.1-5；所述活化的时间为5-30min；

步骤S2、将抗红细胞抗体加入步骤S1得到的活化产物中，进行超声处理；

步骤S3、将封闭剂加入步骤S2得到的产物中进行封闭，强磁分离，得到用于分离红细胞的免疫磁珠。

本发明的目的及解决其技术问题还可采用以下技术措施进一步实现。

优选的，前述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法，其中所述的磁珠为包覆有四氧化三铁或三氧化二铁的微球，表面带有羧基、氨基或羟基。

优选的，前述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法，其中所述的磁珠为包裹有四氧化三铁的聚苯乙烯微球。

优选的，前述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法，其中所述的磁珠的粒径为1-5μm。

优选的，前述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法，其中所述的活化剂包括1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、戊二醛、过碘酸盐和氯胺-T中的至少一种。

优选的，前述的用于分离红细胞的免疫磁珠的制备方法，其中步骤S2中，所述的抗红细胞抗体与磁珠的质量比为：1：10-1000。