[发明专利]一种肝胆酸测定试剂盒的制备及检测方法

说明书

本发明在于提供一种肝胆酸检测试剂盒的制备，将制备的抗体胶乳颗粒加入到试剂R2中，配制成独立包装的试剂R1和试剂R2，采用胶乳增强免疫比浊法检测血清样本中的肝胆酸，其检测快速、精准、准确度高、特异性强、精密度好、成本较低，且检测样本量少，可进行少量样本和急诊样本的测定。

技术领域

本发明属于医药试剂技术领域。

背景技术

血清甘胆酸(Cholyglycine, CG) 是胆酸与甘氨酸结合而成的结合型胆酸之一，在肝细胞内，胆固醇经过及其复杂的酶促反应，转变成初级胆汁酸。其中有胆酸(CA)和鹅去氧胆酸（CD-CA）。胆酸的类固醇核上有三个羟基(C3、C7、C12），侧链末端的羟基以肽键与甘氨酸结合，分子量为462u。

CG正常代谢途径为肠—肝循环，CG由 肝细胞合成，经毛细胆管、胆管排入胆囊，随同胆汁进入十二指肠，帮助食物消化。95%胆酸在回肠末端重吸收，经门静脉再回肝脏，由肝细胞摄取再利用。在血清中主要以蛋白结合形式存在，溢入体循环的总量小于1 %。在正常情况下,外周血中胆酸含量甚微,正常成人无论空腹或餐后,其血清CG浓度稳定在低水平。

当肝细胞受损时，肝细胞摄取CG能力下降，致使血中CG含量增高；胆汁郁滞时，肝脏排泄胆酸发生障碍，而返流血液循环的CG含量增高，也使血CG含量增高。因此，用RIA（radioimmunoassay放射免疫测定法）法测定血清甘胆酸（CG）是评价肝细胞功能及其肝胆系物质循环功能的敏感指标之一。

现有技术中，肝胆酸的检测方法包括酶联免疫吸附测定(ELISA)、化学发光免疫分析法(CLIA)和免疫比浊法等。其中，酶联免疫吸附测定检测准确度高，但操作过程略显复杂、测定时间较长、影响因素多，且不适合急诊样本的检测；化学发光免疫分析法测定其自动化操作速度快，但是成本高、设备昂贵、稳定性较差，无法普及中基层医院及医疗机构；免疫比浊法测定，抗原或抗体量过大时，可出现可溶性复合物，造成误差，易受脂血影响。

发明内容

本发明在于提供一种肝胆酸检测试剂盒的制备，利用胶乳免疫比浊法，其检测快速、精准、准确度高、特异性强、精密度好、成本较低，且检测样本量少，可进行少量样本和急诊样本的测定。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

本发明所述的肝胆酸检测试剂盒，其包含独立包装的试剂R1和试剂R2，所述的试剂R1包含以下浓度的组分：

缓冲液：50-200mmol/L；

离子溶液：5-20g/L；

表面活性剂：0.1-2g/L；

促凝剂：10-40g/L

防腐剂：0.5-2g/L；

所述的试剂R2包含以下浓度的组分：

缓冲液：50-200mmol/L；

抗体胶乳颗粒10-40mg/L；

稳定剂1-10g/L；

防腐剂：0.5-2g/L；

优选地，所述的试剂R1、试剂R2中的缓冲液是TRIS缓冲液、磷酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液、碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液、氨基乙酸缓冲液中的一种或多种；

优选地，所述的试剂R1中的离子溶液是氯化钠溶液、氯化钾溶液、氯化镁溶液中的一种或多种；

优选地，所述的试剂R1中的表面活性剂是曲拉通X-100、曲拉通X-305、吐温-20、吐温-80、B66中的一种或多种；

优选地，所述的试剂R1中的促凝剂是聚乙二醇-6000、聚乙二醇-8000和聚乙二醇-20000中的一种或多种；