[发明专利]一种肝胆酸测定试剂盒的制备及检测方法

权利要求书

1.一种肝胆酸测定试剂盒，其包含独立包装的试剂R1和试剂R2，试剂R1包含以下浓度的组分：

缓冲液：50-200mmol/L；

离子溶液：5-20g/L；

表面活性剂：0.1-2g/L；

促凝剂：10-40g/L

防腐剂：0.5-2g/L；

试剂R2包含以下浓度的组分：

缓冲液：50-200mmol/L；

抗体胶乳颗粒10-40mg/L；

稳定剂1-10g/L；

防腐剂：0.5-2g/L。

2.根据权利要求1所述的一种肝胆酸测定试剂盒，其特征在于，试剂R1、试剂R2中的缓冲液是TRIS缓冲液、磷酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液、碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液、氨基乙酸缓冲液中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的一种肝胆酸测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂R1中的离子溶液是氯化钠溶液、氯化钾溶液、氯化镁溶液中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的一种肝胆酸测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂R1中的表面活性剂是曲拉通X-100、曲拉通X-305、吐温-20、吐温-80、B66中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的一种肝胆酸测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂R1中的促凝剂是聚乙二醇-6000、聚乙二醇-8000和聚乙二醇-20000中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的一种肝胆酸测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂R1、试剂R2中的防腐剂是PC300、NaN3中的一种。

7.根据权利要求1所述的一种肝胆酸测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂R2中的稳定剂是内牛清白蛋白、酪蛋白、蔗糖中的一种。

8.根据权利要求1所述的一种肝胆酸测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂R2中的抗体胶乳颗粒制备步骤为：

准备：准备120-300nm的聚苯乙烯胶乳颗粒，胶乳颗粒用pH7.0的5mM/L 2-（N-吗啡啉）乙磺酸稀释至终浓度为1-3%w/v得到胶乳颗粒溶液；将肝胆酸羊多抗用pH7.0的5mM/L 2-（N-吗啡啉）乙磺酸稀释至终浓度为0.05-0.15%w/v得到抗体溶液；

偶联：将抗体溶液缓慢加入到胶乳颗粒溶液中，37℃ 220转/分钟偶联30分钟；再加入20mg/L的1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐（EDC），37℃ 220转/分钟偶联60分钟，即得到抗体胶乳颗粒；

封闭：加入10%牛血清白蛋白溶液15mL，37℃ 220转/分钟封闭60分钟；

储存：加入试剂R2中的缓冲液50-200mmol/L，37℃ 220转/分钟60分钟。