[发明专利]一种用于人类辅助生殖的颗粒细胞去除液及其制备方法

权利要求书

1.一种用于人类辅助生殖的颗粒细胞去除液及其制备方法，其特征在于，用于处理卵子的颗粒细胞的透明质酸酶溶解于含有聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinyl Pyrrolidone,PVP)、抗菌素和人血白蛋白的盐溶液中配制而成。

2.根据权利要求1所述的一种用于人类辅助生殖的颗粒细胞去除液及其制备方法，其特征在于，所述透明质酸酶为透明质酸酶(羊睾丸)，浓度为30～90IU/ml。

3.根据权利要求1所述的一种用于人类辅助生殖的颗粒细胞去除液及其制备方法，其特征在于，所述聚乙烯吡咯烷酮为PVP-K30，浓度为2～6g/L。

4.根据权利要求1所述的一种用于人类辅助生殖的颗粒细胞去除液及其制备方法，其特征在于，所述抗菌素为硫酸庆大霉素,浓度为7～14μg/ml。

5.根据权利要求1所述的一种用于人类辅助生殖的颗粒细胞去除液及其制备方法，其特征在于，所述人血白蛋白浓度为5～15mg/mL。

6.根据权利要求1所述的一种用于人类辅助生殖的颗粒细胞去除液及其制备方法，其特征在于，所述盐溶液是以4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)和3-(N-吗啉基)丙磺酸(MOPS)为缓冲剂，以钠、钾、镁、钙离子为基础，并以葡萄糖、丙酮酸钠、乳酸钠、谷氨酰胺、非必需氨基酸为能量物质的化合物培养溶液；其中包含：氯化钠95.00～105.00mmol/L、氯化钾3.45～6.55mmol/L、硫酸镁0.55～0.65mmol/L、氯化钙1.75～2.22mmol/L、磷酸二氢钠0.18～0.39mmol/L、碳酸氢钠3.85～5.45mmol/L、HEPES和MOPS 15.00～25.00mmol/L、葡萄糖0.38～0.68mmol/L、丙酮酸钠0.28～0.42mmol/L、乳酸钠12.48～23.68mmol/L、谷氨酰胺0.32mmol/L～0.84mmol/L、非必需氨基酸5～15mmol/L。

7.根据权利要求1所述的一种用于人类辅助生殖的颗粒细胞去除液及其制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)称量各种无机盐组分溶于注射级用水中，配制成盐溶液，

(2)加入硫酸庆大霉素、葡萄糖、丙酮酸钠、乳酸钠和谷氨酰胺溶于盐溶液中；溶解过程先加固体原料，再加液体原料；

(3)加入所述非必需氨基酸,聚乙烯吡咯烷酮(PVP),人血白蛋白以及透明质酸酶；

(4)检测步骤(3)所得盐溶液的渗透压和pH值，并记录最终渗透压和pH值；所述渗透压保持为250～310mOsm/Kg，所述pH值保持为7.00～7.40；

(5)将步骤(4)所得溶液经过0.2μm滤膜过滤灭菌后，取样测试；测试参数：

A、pH值：7.00～7.40；

B、渗透压：250～310mOsm/Kg；

C、内毒素：＜0.25EU/ml；

D、1细胞鼠胚培养到96h：≥80％的囊胚形成率；

(6)将配置好的溶液进行无菌分装和贴标签。