[发明专利]一种核酸检测设备及其使用方法

说明书

发明解决了目前核酸检测设备不能便携或者集成度不高，检测流程复杂、耗时长、检测人员要求高的问题，提供了一种简单便携、快速、低成本进行有效检测的设备以及该设备的使用方法，一种核酸检测设备，其特征在于，包括：第一保护层；加样层，由加样区以及与所述加样区相连的通道构成；反应层，包括独立的样品检测区、阴性对照区、阳性对照区；第二保护层，为疏水的透明薄膜；所述的第一保护层、加样层、反应层、第二保护层按照顺序集成在一起，所述的加样区位于所述的加样孔的下部，所述的通道末端分别与所述的样品检测区、阴性对照区、阳性对照区相连；一种核酸检测设备的使用方法，具体使用步骤如下：制备样品溶液；加样；观测。

技术领域

本发明涉及即时检测技术领域，具体涉及一种核酸检测设备及其使用方法。

背景技术

流行性疾病尤其是病毒性流行性疾病如人类免疫缺陷病毒（HIV），寨卡病毒（ZIKV），甲型流行性感冒（H1N1），新型冠状病毒（SARS-CoV-2）等正在世界范围内威胁着人类的健康。针对流行性疾病最有效的防治措施则是早检测，早诊断。

目前临床用于流行性疾病的病原体检测主要是基于核酸扩增的基因诊断技术，如聚合酶链式反应（PCR）、环介导等温扩增 (LAMP)、重组酶聚合酶 扩增技术(RPA)等。这些技术的主要实施流程主要包括从样品中提取核酸，纯化核酸，扩增核酸，检测信号，这往往需要特定的实验室，熟练的实验人员以及昂贵的实验仪器，且通常也很费时。为了在更大范围内对病原体进行检测，尤其是资源匮乏的地区或人流量较大的区域，发明人认为，为了对流行性疾病进行更有效的防治，我们需要建立成本更低，操作更简洁的检测设备/方法。

微流控芯片技术作为新兴的技术，目前已逐渐向集成化的方向发展，将其应用于核酸检测技术中，会带来重要的革新。其中，纸基微流体芯片加工简单，成本低廉、轻便易携、可生物降解，其多孔结构可进行自发地毛细孔虹吸作用无需额外流体驱动力，可以作为良好的核算检测平台，目前已有多种不同设计的纸基芯片应用于核酸检测中。但是，暂时还没有高度集成一体化的装置，通常需要核酸提前进行提取纯化，需要提前混合扩增试剂或者后续添加反应试剂，扩增反应与信号检测分离，这些缺陷均会限制其使用环境，且对使用人员能力要求较高。发明人基于对微流控技术的研究经验与学术基础，建立了一种具有高度的集成化，轻便、简单的核酸检测设备，其可以实现更快速、更方便的核酸检测。

发明内容

本发明解决了目前核酸检测设备不能便携或者集成度不高，检测流程复杂、耗时长、检测人员要求高的问题，提供了一种简单便携、快速、低成本进行有效检测的设备以及该设备的使用方法。

根据本发明的第一个方面，提供了一种核酸检测设备，其特征在于，包括：

第一保护层，为疏水的透明薄膜，所述薄膜中间开有一个加样孔；

加样层，由加样区以及与所述加样区相连的通道构成，所述的通道数量至少为三条；

反应层，包括独立的样品检测区、阴性对照区、阳性对照区，所述的样品检测区、阴性对照区、阳性对照区的数量至少有一个，所述的样品检测区固着有LAMP扩增反应试剂、目标核酸的引物、检测试剂的冻干粉，所述的阴性对照区与所述样品检测区的区别是不含有目标核酸的引物，所述的阳性对照区与所述样品检测区的区别是增加有目标核酸的阳性对照物；

第二保护层，为疏水的透明薄膜；

所述的第一保护层、加样层、反应层、第二保护层按照顺序集成在一起，所述的加样区位于所述的加样孔的下部，所述的通道末端分别与所述的样品检测区、阴性对照区、阳性对照区相连。

进一步的，所述的加样层、反应层材料为多孔纤维材料，纤维孔径0.2-30μm，所述的多孔纤维材料包括亲水性的滤纸，或者是由以下一种或多种组成的滤膜：醋酸纤维素、硝酸纤维素、混合纤维素。