[发明专利]一种核酸检测设备及其使用方法

权利要求书

1.一种核酸检测设备，其特征在于，包括：

第一保护层，为疏水的透明薄膜，所述薄膜中间开有一个加样孔；

加样层，由加样区以及与所述加样区相连的通道构成，所述的通道数量至少为三条；

反应层，包括独立的样品检测区、阴性对照区、阳性对照区，所述的样品检测区、阴性对照区、阳性对照区的数量至少有一个，所述的样品检测区固着有LAMP扩增反应试剂、目标核酸的引物、检测试剂的冻干粉，所述的阴性对照区与所述样品检测区的区别是不含有目标核酸的引物，所述的阳性对照区与所述样品检测区的区别是增加有目标核酸的阳性对照物；

第二保护层，为疏水的透明薄膜；

所述的第一保护层、加样层、反应层、第二保护层按照顺序集成在一起，所述的加样区位于所述的加样孔的下部，所述的通道末端分别与所述的样品检测区、阴性对照区、阳性对照区相连。

2.根据权利要求1所述的核酸检测设备，其特征在于，所述的加样层、

反应层材料为多孔纤维材料，纤维孔径0.2-30μm，所述的多孔纤维材料包括亲水性的滤纸，或者是由以下一种或多种组成的滤膜：醋酸纤维素、硝酸纤维素、混合纤维素。

3.根据权利要求1或2所述的核酸检测设备，其特征在于，所述的LAMP

扩增反应试剂包括：DNA扩增酶，RNA逆转录酶、dNTPs，MgSO4，Tris-HCl, KCl, (NH4)2SO4, Triton X-100, MnCl2，所述的检测试剂包括：荧光探针、PH敏感型指示剂、钙黄绿素。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的核酸检测设备，其特征在于，所述

的疏水透明薄膜包括：PDMS、PCL、PP、PET。

5.根据权利要求1-4任意一项所述的核酸检测设备，其特征在于，所述

的通道的宽度为1-8mm，所述的第一保护层、第二保护层的尺寸为10-60mm。

6.根据权利要求1-6任意一项所述的核酸检测设备，其特征在于，所述

的加样孔上覆盖有透明胶。

7.根据权利要求1-6任意一项所述的核酸检测设备，其特征在于，所述

的加样层结构以及所述的反应层独立的样品检测区、阴性对照区、阳性对照区的加工方法包括：剪裁。

8.一种核酸检测设备的使用方法，其特征在于，用到权利要求1-7任意

一项的核酸检测设备，具体使用步骤如下：

（1）制备样品溶液：

将待检样品浸泡/混合于无酶水、生理盐水、细胞裂解液中形成样品溶液；

（2）加样：

将样品溶液通过加样孔加入到加样区，待液滴被全部吸收后，将设备置

于65℃的加热装置中进行恒温加热；

（3）观测：

每10 min对检测层进行观察比对，直至获得比对结果。

9.根据权利要求8所述的核酸检测设备的使用方法，其特征在于，所

述的待检样品包括：拭子样品、血液样品、尿液样品，所述的细胞裂解液包括：Triton，尿素，SDS，甲酰胺。