[发明专利]抗体偶联氧化石墨烯的制备方法与应用在审
| 申请号: | 202010445226.8 | 申请日: | 2020-05-24 |
| 公开(公告)号: | CN111494646A | 公开(公告)日: | 2020-08-07 |
| 发明(设计)人: | 冯增兴;吴韬;闫誉馨;杨竣翔;谌昊;夏娜;赵海涛 | 申请(专利权)人: | 宁波诺丁汉新材料研究院有限公司;宁波诺丁汉大学 |
| 主分类号: | A61K47/68 | 分类号: | A61K47/68;A61K47/60;A61K41/00;A61P31/18 |
| 代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 刘静 |
| 地址: | 315000 浙江省宁波*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 抗体 氧化 石墨 制备 方法 应用 | ||
1.一种抗体偶联氧化石墨烯的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤;
(1)将人类单克隆抗体(mAbs)与氧化石墨烯通过连接剂1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)卡二亚胺(EDC)进行生物偶联制备偶联复合物;
(2)在步骤(1)制备的偶联复合物中加入聚乙二醇,通过相同的连接剂1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)卡二亚胺(EDC)和聚乙二醇和偶联复合物中的氧化石墨烯之间形成的酯键,将聚乙二醇偶联到氧化石墨烯上,制备得到聚乙二醇化抗体偶联氧化石墨烯PEGs-ACGO。
2.根据权利要求1所述的一种抗体偶联氧化石墨烯的制备方法,其特征在于,所述偶联发生在单克隆抗体(mAb)重链上的酰胺基团和氧化石墨烯上的羧基团之间。
3.根据权利要求1所述的一种抗体偶联氧化石墨烯的制备方法,其特征在于,所述氧化石墨烯通过生物质制备得到。
4.根据权利要求3所述的一种抗体偶联氧化石墨烯的制备方法,其特征在于,所述生物质的材料包括秸秆、木屑和市政垃圾。
5.根据权利要求1所述的一种抗体偶联氧化石墨烯的制备方法,其特征在于,所述氧化石墨烯由与氧化石墨烯具有相同近红外光谱吸收度的纳米粒子替代。
6.根据权利要求1所述的一种抗体偶联氧化石墨烯的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,人类单克隆抗体(mAbs)具有结合GP41肽的能力,为-2F5、4E10和VRC01单克隆抗体。
7.根据权利要求6所述的一种抗体偶联氧化石墨烯的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,将1mg氧化石墨烯(GO)加入到含有5mmol/的2-吗啉乙磺酸(MES)和4mg/ml的EDC的缓冲溶液中,对氧化石墨烯进行活化;分别取-2F5、4E10和VRC01各25μg,添加到活化的氧化石墨烯中,完成生物偶联过程。利用原子力显微镜AFM对纯氧化石墨烯、活化的氧化石墨烯及抗体偶联氧化石墨烯进行表征,验证其是否成功偶联。
8.一种抗体偶联氧化石墨烯的应用,其特征在于,聚乙二醇化抗体偶联氧化石墨烯PEGs-ACGO根据需求在近红外光下进行等时间间隔(30秒)的阶段性照射,诱导局部加热,通过外部刺激提高与HIV病毒有关的靶向位置的温度,从而消除受感染细胞和HIV病毒。
9.根据权利要求8所述的一种抗体偶联氧化石墨烯的应用,其特征在于,抗体偶联氧化石墨烯过程中,单克隆抗体选择VRC01时,该应用效果最佳。
10.根据权利要求8所述的一种抗体偶联氧化石墨烯的应用,其特征在于,通过微波或可被氧化石墨烯吸收的其他形式光源照射,提高聚乙二醇化抗体偶联氧化石墨烯PEGs-ACGO温度。
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