[发明专利]CRISPR支持的多路基因组工程化在审
申请号: | 202010437901.2 | 申请日: | 2015-02-11 |
公开(公告)号: | CN111705365A | 公开(公告)日: | 2020-09-25 |
发明(设计)人: | R·T·吉尔;安德鲁·加斯特 | 申请(专利权)人: | 科罗拉多州立大学董事会(法人团体) |
主分类号: | C40B40/02 | 分类号: | C40B40/02;C12N15/10;C12N9/22 |
代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人: | 武晶晶 |
地址: | 美国科*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | crispr 支持 路基 工程 | ||
1.一种文库,其包含细胞群体,所述细胞群体包含载体,所述载体包含:
(i)编辑盒,其包含与细胞中核酸的靶区域同源并且包含相对于该靶区域的至少一个核苷酸的突变的区域,和赋予核酸酶介导的编辑免疫力的位点;
(ii)启动子;以及
(iii)至少一个指导RNA(gRNA),所述gRNA包含与所述靶区域的一部分互补的区域(RNA)和募集内切酶的区域。
2.根据权利要求1所述的文库,其中所述文库进一步包含含有靶区域的核酸。
3.根据权利要求1或2所述的文库,其中所述文库进一步包含可通过所述gRNA募集的内切酶。
4.根据权利要求1所述的文库,其中所述启动子是诱导型启动子。
5.根据权利要求1所述的文库,其中所述启动子是阻抑型启动子。
6.根据权利要求1所述的文库,其中所述细胞是原核细胞。
7.根据权利要求1所述的文库,其中所述细胞是真核细胞。
8.根据权利要求1所述的文库,其中所述载体包含多于一个的编辑盒。
9.根据权利要求1所述的文库,其中所述载体编码与不同靶区域的一部分互补的至少两个gRNA。
10.根据权利要求1所述的文库,其中所述编辑盒包含靶区域,该靶区域包含PAM突变的100个核苷酸内的至少一个密码子的突变。
11.根据权利要求1所述的文库,其中所述载体进一步包含至少两个引发位点。
12.根据权利要求1所述的文库,其中赋予核酸酶介导的编辑免疫力的所述位点是前间隔区邻近基序(PAM)突变。
13.根据权利要求1所述的文库,其中可通过所述gRNA募集的所述内切酶是Cas9。
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