[发明专利]一种利用线粒体分子标记鉴定茶蚜的方法及其应用有效
| 申请号： | 202010434625.4 | 申请日： | 2020-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN111518919B | 公开（公告）日： | 2023-09-26 |
| 发明（设计）人： | 蒲德强;刘虹伶;刘超;伍兴隆;肖科军;陈宇;罗曦;毛建辉 | 申请（专利权）人： | 四川省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理有限公司 11562 | 代理人： | 张雪 |
| 地址： | 610066 *** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 线粒体 分子 标记 鉴定 方法 及其 应用 | ||
1.一种利用线粒体分子标记鉴定茶蚜的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取供试样品中的DNA；
(2)采用线粒体分子标记对供试样品的模板DNA进行PCR，获取PCR扩增产物；
(3)对所得PCR扩增产物进行凝胶电泳，对电泳检测结果通过分析基本核心SSR结果，确定供试样品的品种；
所述线粒体分子标记的扩增引物为以下SSR引物：
F：5’-TGGAACAGGAACAGGATGAACT-3’；
R：5’-ACTCCTGTTAATCCTCCGATTGT-3’。
2.根据权利要求1所述的利用线粒体分子标记鉴定茶蚜的方法，其特征在于，步骤(2)中，扩增体系20μL，包括：5×FastPfuBuffer 4μL、2 .5mM dNTPs 2μL、5μM引物各0 .8μL、DNA聚合酶0 .4μL、DNA模板10ng，加水补充至20μL；
扩增程序：95℃5min，95℃30s，55℃30s，72℃45s，35个循环；72℃10min，10℃保存。
3.根据权利要求1所述的利用线粒体分子标记鉴定茶蚜的方法，其特征在于，步骤(3)中，采用2％琼脂糖凝胶电泳进行检测。
4.一种权利要求1中所述的线粒体分子标记的SSR引物在辅助茶蚜鉴定、DNA指纹图谱构建及遗传多样性评价与系统发育研究中的应用。
5.一种权利要求1-3任一项所述的方法在辅助茶蚜鉴定、DNA指纹图谱构建及遗传多样性评价与系统发育研究中的应用。
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