[发明专利]一种二级仿生酶解技术制备驴骨胶原蛋白肽粉的方法在审
申请号: | 202010434230.4 | 申请日: | 2020-05-21 |
公开(公告)号: | CN111635920A | 公开(公告)日: | 2020-09-08 |
发明(设计)人: | 付改玲;刘厚霞;刘永清;王娟;李小波;王和平;夏敏;马秀环 | 申请(专利权)人: | 内蒙古元本生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/14;C07K1/34 |
代理公司: | 北京植德律师事务所 11780 | 代理人: | 唐华东 |
地址: | 010010 内蒙古自*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 二级 仿生 技术 制备 骨胶原 蛋白 方法 | ||
1.一种驴骨胶原蛋白肽粉的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:超声提取、高压均质、一级生物酶解以及二级生物酶解。
2.根据权利要求1所述的驴骨胶原蛋白肽粉的制备方法,其特征在于,所述提取工艺还包括选自以下一个或多个的步骤:破骨、粉碎、去脂、过滤、收集酶解液、分子截留、过滤、浓缩干燥以及包装得成品。
3.根据权利要求1或2所述的驴骨胶原蛋白肽粉的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
(1)破骨;
(2)粉碎;
(3)去脂;
(4)超声提取;
(5)高压均质;
(6)过滤;
(7)一级生物酶解(模拟人工胃液);
(8)二级生物酶解(模拟人工厂肠液);
(9)收集酶解液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的驴骨胶原蛋白肽粉的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)破骨中,将驴骨破碎,获得破碎的驴骨;优选地,先破碎驴骨,然后清洗,获得粉碎、清洗后的驴骨;优选地,将驴骨破碎成2~6cm的块状;优选地,用纯化水清洗多次,优选清洗2次;
优选地,所述步骤(2)粉碎中,将步骤(1)获得的所述粉碎、清洗后的驴骨用骨泥磨处理成骨泥,获得处理后的骨泥;优选地,骨泥含60%~75%的水分,骨泥细度为60~80目;更优选地,骨泥含70%的水分,骨泥细度为80目;
优选地,所述步骤(3)去脂中,在步骤(2)获得的所述处理后的骨泥中加入多倍体积的水,蒸煮,冷却,去脂,获得去脂处理的骨泥与蒸煮液;优选地,加入2.0~5.0倍水,更优选地,加入纯化水;优选地,蒸煮2h~4h;优选地,于高压蒸煮釜内,121℃,0.2MPa下进行蒸煮;优选地,于-10℃~0℃低温冷却;更优选地,在所述处理后的骨泥中加水2.5倍纯化水,蒸煮2h,-5℃冷却去脂。
5.根据权利要求1-4任一项所述的驴骨胶原蛋白肽粉的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)超声提取中,将步骤(3)获得的所述去脂处理的骨泥与蒸煮液于超声提取仪中提取,获得超声提取物;
优选地,超声功率为500-800w/L,更优选地,超声功率为650w/L;
优选地,在搅拌下进行提取,优选地,搅拌转速为1200~2000r/min,更优选地,搅拌转速为1500r/min;
优选地,超声提取时间为20~50min,更优选地,超声提取30min;
更优选地,超声功率为650w/L,搅拌转速为1500r/min,超声时间为30min。
6.根据权利要求1-5任一项所述的驴骨胶原蛋白肽粉的制备方法,其特征在于,所述步骤(5)高压均质中,将步骤(4)获得的所述超声提取物离心,获得上清液;取上清液于高压均质机中进行均质剪切,获得高压均质后的均质液;
优选地,反复均质3~5次,更优选地,反复均质3次;
优选地,在温度为2~4℃离心10~30min;
优选地,离心转速为2000-6000r/min,更优选地,离心转速为4000r/min;
优选地,在剪切压力为5000-7000Pa下进行均质剪切,优选6000Pa;
优选地,在均质速度为300-700ml/min下进行均质剪切,优选500ml/min;
更优选地,将所述超声提取物于离心机中,2~4℃4000r/min,离心20min,获得上清液;取上清液,于高压均质机中,剪切压力5000-7000Pa,均质速度500ml/min进行均质剪切,反复3次。
7.根据权利要求1-6任一项所述的驴骨胶原蛋白肽粉的制备方法,其特征在于,所述步骤(6)过滤中,将步骤(5)获得的所述高压均质后的均质液过滤;
优选地,于5μm、3μm、1μm分级过滤,收集滤液。
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