[发明专利]乳酸菌胞外多糖的分离及其应用

权利要求书

1.高产胞外多糖的乳酸菌ZJUIDS-2-01，其特征在于：为嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus，保藏号为CGMCC NO.17210。

2.一种胞外多糖的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）、制备脱脂酸乳：

将如权利要求1所述的高产胞外多糖的乳酸菌ZJUIDS-2-01按照2~5 %的接种量接种至浓度为10~12 g/100ml的灭菌脱脂乳中，于37~45℃发酵培养至滴定酸度 70 °T；

置于4±1℃冷藏24~48h，得到脱脂酸乳；

2）、胞外多糖的提取，依次进行以下步骤：

2.1）、等电点法除酪蛋白：

将脱脂酸乳调pH至8.0±0.2，离心，离心所得的上清液调pH至4.6±0.2，离心，取上清液；

2.2）、酶解：

调节2.1）所得的上清液pH至7.5±0.2，加入胰酶于40±5℃酶解2.5±0.5 h，离心，取上清液；

2.3）、三氯乙酸法除蛋白：

向2.2）所得的上清液中加入三氯乙酸至三氯乙酸终浓度为9~11 g/100ml，从而使蛋白质变性， 4±1℃沉淀1±0.2h后，离心，收集上清液；

2.4）乙醇沉淀：

向2.3）所得的上清液中加入预冷的无水乙醇，调配成乙醇终浓度为15%~60%的溶液， 4±1℃沉淀过夜，离心，收集所得的沉淀重溶于超纯水中；

2.5）透析：

将2.5）所得的沉淀重溶于超纯水后所得的溶液装入透析袋， 4±1℃超纯水透析48±4h；得胞外多糖溶液；

2.6）冷冻干燥：

将2.5）所得的胞外多糖溶液真空冷冻干燥，得胞外多糖粗提物。

3.根据权利要求2所述的胞外多糖的制备方法，其特征在于：

所述步骤2.2）：

加入占2.1）所得的上清液1/9~1/11体积的胰酶液进行酶解，胰酶液的浓度为3±0.3g/L，胰酶为2500±300 U/g；

所述步骤2.4）：

重溶所用的超纯水的体积量=步骤2.3）所得的上清液的体积量；

所述步骤2.5）：

透析袋的截留分子量14000 Da，透析过程中，每8±2h换水一次；

所述步骤2.6）：

真空冷冻干燥时间为44~50 h。

4.一种发酵剂，其特征在于：所述发酵剂活性成分含有或仅为如权利要求1所述的高产胞外多糖的乳酸菌ZJUIDS-2-01。

5.如权利要求1所述的高产胞外多糖的乳酸菌ZJUIDS-2-01、如权利要求4所述的发酵剂的用途，其特征在于：以脱脂乳为原料制备脱脂酸乳；所述脱脂酸乳高含胞外多糖。