[发明专利]一株控制梨果展青霉素的酵母菌及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，涉及一株控制展青霉素的酵母菌及其应用，酵母为季也蒙毕赤酵母Y1，保藏菌株编号为CCTCC NO：M 2017270，用于降解展青霉素或用于控制梨果的展青霉素，对水晶梨整果或果实伤口处的展青霉素均有良好的控制效果；梨果自然腐烂时，对照组中展青霉素浓度为4.41μg/mL，使用季也蒙毕赤酵母Y1的实验组的展青霉素含量仅为1.24μg/mL；果实伤口处的展青霉素相比于对照组，展青霉素含量下降了72％；同时，该酵母可直接降解展青霉素，当展青霉素终浓度10μg/mL，酵母初始浓度为1×10⁸cells/mL时，可完全降解展青霉素，且24‑36h内酵母对其降解速率最大。

技术领域

本发明属于生物控制毒素的方法，具体涉及一株控制梨果展青霉素的酵母菌及其应用。

背景技术

展青霉素又名棒曲霉素，是一种毒性极强的聚酮类次级代谢产物，分子式为C₇H₆O₄，化学名称：4-羟基4-氢-呋喃(3，2-碳)吡喃-2(6-氢)酮，易溶于低pH水和乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂中。青霉属、拟青霉属、曲霉属、丝衣霉属等真菌是展青霉素的主要产生菌,展青霉素主要存在于霉烂的水果及其制品中,是影响水果及果汁饮料质量的主要因素之一。展青霉素已被证实有急性、慢性毒性，包括致畸、致癌和致突变性等。

全世界范围内展青霉素的污染非常严重，广泛存在于多种水果、水果制品和果酒中，这不仅威胁人体的健康，还会造成巨大的经济损失。鉴于展青霉素的广谱毒性，国际食品法典委员会、大多数欧美国家限定标准为为0-50μg/kg；欧盟对展青霉素含量制定了更详细和严格的标准：果汁及苹果饮料中展青霉素最高含量为50μg/kg；固体的苹果制品中展青霉素最高含量为25μg/kg；婴幼儿食用的液体或固体苹果产品中展青霉素最高含量为10μg/kg；我国也制定了相应的标准，苹果、山楂半成品限量标准为100μg/kg，果汁、果酱、果酒、罐头和果脯的限量标准为50μg/kg。Ji等人对我国137个苹果产品中PAT的含量进行检测，结果表明，样品中展青霉素的检出率高达31％，含量分布在10-276.9μg/kg。

控制展青霉素的方法主要包括物理方法、化学方法及生物方法。物理方法主要采用人工采选、高压水冲洗、冷藏、果汁的澄清，过滤和吸附、巴氏消毒、以及辐射等措施对原料果及受展青霉素污染的苹果汁进行处理。人工采选不仅要花费大量人力，且挑选后的苹果在货架期也会感染霉菌产生展青霉素，可见即使严格的筛选也不能避免展青霉素的污染。高压水冲洗对设备要求高，成本巨大，且对小规模种植户并不适用。活性碳吸附虽然能去除部分展青霉素，但会导致果汁的色泽、酚含量下降，严重影响果汁的品质。紫外照射同样不能完全去除果汁中的展青霉素。化学方法分为两类：一类是采用化学物质处理防止产毒菌的侵染，从而防止展青霉素的产生；另一类是用化学物质处理，清除已产生的展青霉素。但是化学杀菌剂的使用会使真菌产生耐药性并且污染环境，利用化学物质清除已产生的展青霉素目前还处在试验阶段，安全性得不到保障。

目前亟需一种安全有效的生物脱毒技术；目前酵母菌是研究的热点，也展现出良好的应用前景，但相关研究在国际范围内目前尚处于起步阶段，影响了生物防治技术在展青霉素控制方面的应用。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明旨在解决上述问题之一；本发明提供一株分离自梨果园的季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)Y1，该酵母对梨果的展青霉素具有显著的控制作用，并对展青霉素具有较强的降解作用，具有潜在的应用价值。

本发明使用的季也蒙毕赤酵母，已经ICR小鼠急性毒性试验，确定其具有高度安全性，对人体无害。

本发明所提供的控制展青霉素的季也蒙毕赤酵母系从镇江市世业洲农业生态果园的梨果中筛选分离到的，在NYDA固体培养基平板上28℃培养，进行形态学观察；已经对该菌株的5.8S rDNA-ITS区序列进行分析并进行了分子生物学鉴定。