[发明专利]一种大规模、高通量、高安全性干细胞库的构建方法有效

专利信息
申请号: 202010409340.5 申请日: 2020-05-14
公开(公告)号: CN111607561B 公开(公告)日: 2023-08-11
发明(设计)人: 曹毓琳;张兴鹏 申请(专利权)人: 北京唐颐惠康生物医学技术有限公司
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775;A01N1/02
代理公司: 北京卓爱普专利代理事务所(特殊普通合伙) 11920 代理人: 王玉松;宋丹丹
地址: 100010 北京市*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 大规模 通量 安全性 干细胞 构建 方法
【权利要求书】:

1.一种大规模、高通量、高安全性干细胞库的构建方法,其特征在于,所述构建方法主要包括以下步骤:

S1:将干细胞悬液灌装于麦管内进行非玻璃化冻存;

S11:通过麦管自动灌装标识系统将干细胞悬液自动灌装到所述麦管中,并对灌装干细胞悬液后的麦管进行封口、打印、识别;所述麦管自动灌装标识系统包括:控制箱、喷码机、识别设备、灌装设备和热合设备;所述控制箱用于控制所述灌装设备对麦管进行灌装,所述喷码机用于在麦管上喷码,识别设备用于识别麦管上的条形码,所述热合设备用于对灌装干细胞悬液后的麦管进行热合封口;所述灌装设备还包括:源样本袋(1)、与源样本袋(1)连通的注液管(2)、与所述注液管(2)连接的蠕动泵(3)、与所述注液管(2)底端连接的出液管(4),所述出液管(4)向所述麦管内灌装干细胞悬液,所述源样本袋(1)的出液端与所述注液管(2)的端部密封连接,所述源样本袋(1)上设有震动装置(5);

S12:通过麦管程序降温系统对盛装干细胞悬液的麦管进行程序降温;所述程序降温是将所述程序降温盒放入-80℃的冰箱内保持12h;

所述程序降温盒包括顶端开口的盒体(6)和与所述盒体(6)配套的盒盖(7),所述盒体(6)由EVA泡绵制成,所述盒体(6)内等间隔设有若干个竖直的EVA泡绵板(8),相邻两个所述EVA泡绵板(8)之间设有导热芯(9),所述EVA泡绵板(8)和/或盒体(6)上设有多个麦管插槽(10);

S13:通过麦管冷冻存储系统盛装程序降温后的麦管,并放入液氮罐内进行冻存;冻存过程中还包括安全运输,安全运输是通过干式液氮罐将程序降温后的麦管运输至冷冻存储系统内进行冻存;

所述麦管冷冻存储系统是先将麦管放入冻存盒内,再将冻存盒放置于冻存架,再将所述冻存架放置于液氮罐内进行冻存,所述麦管专用冻存盒包括壳体(11)和与所述壳体(11)配合的盖子,所述壳体(11)内设有网状隔离槽(13),所述网状隔离槽的每个隔离槽(13)内均设有塑料柱状体(12),每个所述塑料柱状体(12)上均设有若干麦管冻存槽(14);麦管专用冻存架包括侧面开口的框架(15),所述框架(15)由下至上等间隔设有若干个隔板(16),所述隔板(16)的长度和宽度大于所述冻存盒的长度和宽度,相邻两个所述隔板(16)之间的距离大于所述冻存盒的高度;所述壳体(11)相对的两个外侧壁水平设有通槽(17),所述框架(15)左侧壁和右侧壁分别设有与所述通槽(17)相适配的凸块(18),所述隔板(16)上方设有挤压板(19),所述挤压板(19)与所述隔板(16)之间垂直设有弹簧(20);

S2:将内置有冻存后的干细胞混悬液的麦管放置于埋伏式恒温金属浴中进行复苏,复苏是在37℃条件下进行的。

2.如权利要求1所述的大规模、高通量、高安全性干细胞库的构建方法,其特征在于,所述复苏过程中还包括安全运输,所述安全运输是通过干式液氮罐将冷冻存储系统中的麦管运输至埋伏式恒温金属浴中复苏。

3.如权利要求1所述的大规模、高通量、高安全性干细胞库的构建方法,其特征在于,所述导热芯(9)的数量为3个,所述EVA泡绵板(8)的数量为2个,所述盒体的厚度为10mm,所述盒体的尺寸为长120mm×宽70mm×高155mm,所述盒盖的高度为20mm,所述导热芯(9)和所述EVA泡绵板(8)的尺寸均为长100mm×宽10mm×高140mm,每个所述EVA泡绵板(8)以及两个与所述EVA泡绵板(8)相平行的所述盒体(6)的侧壁上均设有24个麦管插槽(10)。

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