[发明专利]直接测定复方氨基酸注射液中色氨酸3种降解产物的方法

说明书

本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种直接测定复方氨基酸注射液中色氨酸3种降解产物的方法。色氨酸3种降解产物是指：二氧吲哚丙氨酸、犬尿氨酸和2‑羟基色氨酸，具体步骤如下：(1)液相色谱仪的色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相：流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为乙腈；流速：0.95～1.05mL/min；柱温：25～35℃；进样量：5～100μL；梯度洗脱；检测波长：254nm；(2)制备供试品溶液；(3)制备对照品溶液；(4)测定。该方法专属性强、灵敏度高、重复性好，解决了处方中其他氨基酸成分干扰，以及其他检测方法中因衍生反应导致测定结果不准确等技术难题，保证了产品质量。

技术领域

本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种直接测定复方氨基酸注射液中色氨酸3种降解产物的方法。

背景技术

复方氨基酸注射液处方中含有色氨酸、甲硫氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸等几种到几十种氨基酸，其作为重要的肠外营养药，广泛应用于临床，满足患者体内氨基酸需要。其中，色氨酸作为人体内必需氨基酸，在光、热、氧等条件下，容易发生降解，影响产品质量。其中，色氨酸及其三种降解产物的结构式如下：

因复方氨基酸类产品处方成分较复杂，并且大多数成分结构近似，很容易干扰二氧吲哚丙氨酸、犬尿氨酸和2-羟基色氨酸的测定。目前，尚无文献或报道同时检测复方氨基酸注射液中这3种色氨酸降解产物的方法，因此，需建立一种专属性强、简便可行的检测方法，用于控制复方氨基酸产品中这3种色氨酸降解产物的含量。

发明内容

针对以上不足，本发明的目的是提供一种准确、简便的直接测定复方氨基酸注射液中色氨酸3种降解产物的方法，能够同时测定二氧吲哚丙氨酸、犬尿氨酸和2-羟基色氨酸的含量，从而保证复方氨基酸类产品的质量，专属性强、灵敏度高、重复性好。

本发明所述的直接测定复方氨基酸注射液中色氨酸3种降解产物的方法，色氨酸3种降解产物是指：二氧吲哚丙氨酸、犬尿氨酸和2-羟基色氨酸，包括如下步骤：

(1)液相色谱仪的色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流动相：流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为乙腈；

流速：0.95～1.05mL/min；

柱温：25～35℃；

进样量：5～100μL；

洗脱方式：梯度洗脱；

紫外检测器波长：254nm；

(2)制备供试品溶液；

(3)制备对照品溶液；

(4)测定：量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量。

其中：

所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱为岛津、月旭、安捷伦、Waters、Thermo、Phenomenex、COSMOSIL、YMC或SHISEIDO品牌C18色谱柱中的一种。

所述色谱柱的长度为250mm、150mm、100mm或80mm中的一种。

所述流动相中，磷酸盐缓冲液的pH为7.5～7.7。

优选地，所述流速为1.0mL/min。

优选地，所述柱温为30℃。

优选地，所述进样量为20μL。

所述梯度洗脱程序如下：