[发明专利]惰性载体间接凝集试验检测系统及其应用有效

专利信息
申请号: 202010400163.4 申请日: 2020-05-12
公开(公告)号: CN111537712B 公开(公告)日: 2021-01-05
发明(设计)人: 朱国强;杨斌;羊扬;孟霞;夏芃芃;段强德;朱晓芳 申请(专利权)人: 扬州大学
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569;C12N15/31;C12N15/74;C07K14/255
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 王艳
地址: 225009 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 惰性 载体 间接 凝集 试验 检测 系统 及其 应用
【权利要求书】:

1.惰性载体间接凝集试验检测系统,其特征在于,所述间接凝集试验检测系统用于检测鸡白痢沙门氏菌感染,所述间接凝集试验检测系统包括惰性载体菌S9和在其表面展呈表达和携带P抗原因子的复合体S9-P,所述间接凝集试验检测系统是含有鸡白痢沙门氏菌p基因的惰性载体菌S9,惰性载体菌S9的保藏编号为CGMCC No.17340,所述基因p的获得是以鸡白痢沙门氏菌CVCC526株参考株基因组DNA为模板,通过设计特异性引物对进行PCR扩增得到目的基因p,所述特异性引物对为:

p-UP:5' -ATG AAA CGT TCA CTT ATT GCT GCT-3'

p-LO: 5' -TTA A TCA GTT AAT ACC GTC ATC GTC AG-3'。

2.根据权利要求1所述的惰性载体间接凝集试验检测系统,其特征在于,所述检测系统是通过将鸡白痢沙门氏菌p基因与pBR322质粒连接后导入S9电转化感受态细胞中鉴定正确的菌株。

3.权利要求1所述的惰性载体间接凝集试验检测系统的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)鸡白痢沙门氏菌中P抗原因子编码基因p的获得;

2)鸡白痢沙门氏菌中P抗原因子编码基因p与pBR322质粒的连接获得重组质粒;

3)重组质粒p-pBR322转化入S9电转化感受态细胞鉴定得到重组菌株即为惰性载体间接凝集试验检测系统S9-P。

4.根据权利要求3所述的惰性载体间接凝集试验检测系统的构建方法,其特征在于,所述步骤1)中基因p的获得是以鸡白痢沙门氏菌CVCC526株参考株基因组DNA为模板,通过设计特异性引物对进行PCR扩增得到目的基因p

5.根据权利要求4所述的惰性载体间接凝集试验检测系统的构建方法,其特征在于,所述特异性引物对为:

p-UP:5' -ATG AAA CGT TCA CTT ATT GCT GCT-3'

p-LO: 5' -TTA A TCA GTT AAT ACC GTC ATC GTC AG-3'。

6.权利要求1~2任一项所述的惰性载体间接凝集试验检测系统在制备抗原或抗体的间接凝集反应试剂或试剂盒或鸡相关病原感染检测用试剂或试剂盒中的应用。

7.权利要求1~2任一项所述的惰性载体间接凝集试验检测系统在制备鸡白痢沙门氏菌感染检测用试剂或试剂盒中的应用。

8.一种鸡白痢沙门氏菌感染检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒包括权利要求1~2任一项所述的惰性载体间接凝集试验检测系统。

9.根据权利要求8所述的检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒还包括阳性对照和阴性对照。

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