[发明专利]一种用于检测β-地中海贫血的PCR试剂及试剂盒在审
| 申请号： | 202010399422.6 | 申请日： | 2020-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN111593112A | 公开（公告）日： | 2020-08-28 |
| 发明（设计）人： | 艾卉;钱凯;谭毅彬;朱韶凯 | 申请（专利权）人： | 深圳市星蝶科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 北京盛凡智荣知识产权代理有限公司 11616 | 代理人： | 李娜 |
| 地址： | 518103 广东省深圳市宝安区石岩*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 地中海贫血 pcr 试剂 试剂盒 | ||
1.一种用于检测β-地中海贫血的PCR试剂，其特征在于，包括高耐受性直扩PCR酶，缓冲液，dNTP混合物，PCR增强剂，以及用于扩增待检测样品中β珠蛋白基因片段的PCR引物，所述β珠蛋白基因片段含有与β珠蛋白基因突变探针发生特异性杂交的DNA序列。
2.根据权利要求1所述的用于检测β-地中海贫血的PCR试剂，其特征在于，所述PCR引物包括两对引物，分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4。
3.根据权利要求1所述的用于检测β-地中海贫血的PCR试剂，其特征在于，所述PCR增强剂包括二甲基亚砜、甘油、甲酰胺、氯化四甲铵、谷氨酸钾和硫酸铵。
4.根据权利要求1所述的用于检测β-地中海贫血的PCR试剂，其特征在于，所述PCR引物的终浓度为0.4μm-0.8μm。
5.一种用于检测β-地中海贫血的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的用于检测β-地中海贫血的PCR试剂，以及用于检测β-地中海贫血的核酸杂交膜条和杂交试剂。
6.根据权利要求5所述的用于检测β-地中海贫血的试剂盒，其特征在于，所述用于检测β-地中海贫血的核酸杂交膜条包括一尼龙膜基底，以及固定于所述尼龙膜基底上的β珠蛋白基因突变探针和对应的β珠蛋白基因正常探针，所述β珠蛋白基因突变探针选自SEQ IDNO.5～SEQ ID NO.21中的至少一个DNA序列或其反向互补序列，所述β珠蛋白基因正常探针选自SEQ ID NO.22～SEQ ID NO.32中的至少一个DNA序列或其反向互补序列。
7.根据权利要求6所述的用于检测β-地中海贫血的试剂盒，其特征在于，所述β珠蛋白基因突变探针和所述β珠蛋白基因正常探针在5’端或3’端带有氨基标记，所述尼龙膜基底带有羧基标记，所述β珠蛋白基因突变探针和所述β珠蛋白基因正常探针通过共价结合固定在所述尼龙膜基底上。
8.根据权利要求5所述的用于检测β-地中海贫血的试剂盒，其特征在于，所述杂交试剂包括裂解液、洗膜缓冲液、生物素抗体和显色液。
9.根据权利要求8所述的用于检测β-地中海贫血的试剂盒，其特征在于，所述生物素抗体为过氧化物酶，所述显色液为四甲基联苯胺。
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