[发明专利]一种“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法有效
| 申请号: | 202010397711.2 | 申请日: | 2020-05-12 |
| 公开(公告)号: | CN111387059B | 公开(公告)日: | 2022-11-22 |
| 发明(设计)人: | 李宏博;李海燕;赵鑫;王彪 | 申请(专利权)人: | 沈阳农业大学 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 崔瑞迎 |
| 地址: | 110866 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 红花 五味子 组织 再生 植株 方法 | ||
1.一种“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1,胚性愈伤组织的诱导,
选用“红花”五味子的无菌苗叶片接种于1号培养基,培养28-32天后转移至新的1号培养基中继续培养28-32天,然后切除黄褐色坚硬部分后,再转移至新的1号培养基继续培养28-32天,获得胚性愈伤组织;
所述1号培养基以MS培养基为基础,添加有浓度为0.2-3.0mg/L 的2,4-D和浓度为0.1-0.2mg/L的TDZ;
S2,胚性愈伤组织的增殖与扩繁,
将S1中获得的所述胚性愈伤组织接种到2号培养基中培养28-32天,获得后期胚性愈伤组织;
所述2号培养基以MS培养基为基础,添加有浓度为0.1-0.2mg/L 的2,4-D 和浓度为0.1-0.2mg/L的 TDZ;
S3,胚的发生,
将S2中获得的后期胚性愈伤组织切成0.4-0.6cm3的团块接种到3号培养基中培养28-32天,获得胚状体;
所述3号培养基以MS培养基为基础,添加有浓度为0.2-0.5mg/L 的ABA;
S4,胚的发育及植株再生,
将S3中获得的胚状体接种到MS培养基中进行胚发育,28-32天后获得子叶形胚和长出胚根的胚,将所述子叶形胚和长出胚根的胚接种至新的MS培养基中继续培养28-30天,形成幼苗;
S5,再生植株的移栽,
待S4中获得的幼苗形成完整植株后炼苗2-4天,从瓶中取出完整植株,洗净根部的培养基,将其移栽到混合的无菌沙子和泥土中。
2.如权利要求1所述的“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法,其特征在于,S2中,所述2号培养基pH为5.6-6.0,所述胚性愈伤组织的培养条件为:培养温度为23-27℃,光暗周期为16h/8h。
3.如权利要求1所述的“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法,其特征在于,S3中,所述3号培养基pH为5.6-6.0,所述后期胚性愈伤组织的培养条件为:培养温度为23-27℃,光暗周期为16h/8h。
4.如权利要求1所述的“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法,其特征在于,S4中,MS培养基pH均为5.6-6.0。
5.如权利要求1所述的“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法,其特征在于,S4中,所述胚状体和所述子叶形胚以及长出胚根的胚的培养条件均为:培养温度为23-27℃,光暗周期为16h/8h。
6.如权利要求1所述的“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法,其特征在于,S5中,所述沙子和泥土的混合质量比为1:2.5-3.5。
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