[发明专利]原人参二醇衍生物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种原人参二醇衍生物及其制备方法，以及原人参二醇衍生物作为一种治疗癌症的药物应用，及其与PD‑L1/PD‑L2抗体组合联用可以提高对肺癌的抗肿瘤治疗效果，同时减轻副作用的治疗用途。通过该组合用药治疗，可以有效地治疗癌症。

技术领域

本发明涉及一种原人参二醇衍生物及其制备方法和用途，以及所述原人参二醇衍生物和PD-L1/PD-L2抗体在制备治疗癌症的药物中的应用。

背景技术

程序性死亡受体-1(programmed death-1，PD-1)是T细胞上的一种跨膜受体，最早是在凋亡的T细胞杂交瘤中利用消减法得到的。因其参与细胞凋亡，故被命名。PD-1能够与配体PD-L1、PD-L2相互作用，抑制T细胞增殖。PD-L1、PD-L2主要表达于抗原递呈细胞(如DC细胞、巨噬细胞)上。虽然PD-L1与PD-1的单克隆抗体临床应用取得了不俗的成绩，但到目前为止，癌症患者对PD-L1与PD-1的单克隆抗体的响应率仅为20-30％左右。寻找提高PD-L1与PD-1的单克隆抗体临床响应率的联合用药成为目前癌症药物研究的重中之重。

人参为传统中药中最重要的“补气药”，其主要有效成分为人参皂苷。人参皂苷根据苷元结构不同分为二醇组皂苷和三醇组皂苷。口服人参二醇组皂苷主要入血成分和主要活性代谢产物为Rh2；Compound K和原人参二醇，有关原人参二醇的抗癌作用，已有诸多文献报道，中国专利CN1418633A公布了一种以20(S)-原人参二醇为有效成分的抗癌辅助药物及应用。中国专利CN102366417A公布了原人参二醇作为抗癌药的可能，根据专利数据，原人参二醇对不同细胞株的50％生长抑制浓度IC50值介于3.34-918μM之间。从现有技术可以看出，在原人参二醇及其衍生物基础上，进一步对其结构进行研究，开发更有效的抗癌产品，是现阶段研发相关产品的重点。

发明内容

针对现阶段相关PD-1、原人参二醇及其衍生物研发的重点，本发明对原人参二醇的结构进一步研究，发现更有效抗癌化合物，即原人参二醇新的衍生物。

本发明所涉及的原人参二醇衍生物，具有式Ⅰ和Ⅱ的通式，式Ⅰ和Ⅱ为：

式Ⅰ中R₁＝H或者Val；R₂＝H或者Val，其中Val表示缬氨酸。

本发明所涉及的原人参二醇衍生物的制备方法为：

a,取原人参二醇、DMAP，EDCI，Boc保护的缬氨酸，按照当量比为1：3：4：4的当量进行混合，溶剂选为吡啶，40℃下搅拌10个小时，随后将反应液浓缩除去部分吡啶，反应液加入乙酸乙酯，随后10％盐酸洗两次，饱和碳酸钠溶液洗两次，饱和食盐水溶液洗一次，有机层干燥后浓缩，得到Boc保护的原人参二醇缬氨酸酯。

b,将上一步中得到的产物、甲磺酸按照当量比为1：1.8进行反应，溶剂选为甲苯和异丙醇混合溶剂，50℃下搅拌8个小时，随后加入乙酸乙酯，饱和碳酸氢钠溶液洗三次，饱和食盐水溶液洗一次，有机层干燥后浓缩得到粘稠状淡黄色液体，经硅胶柱层析，乙酸乙酯/石油醚(16％–50％)洗脱，得到3-Val-PPD和C-20位脱水的3-Val-PPD原人参二醇缬氨酸衍生物。

c,将纯化过后的3-Val-PPD和C-20位脱水的3-Val-PPD原人参二醇缬氨酸衍生物溶于乙酸乙酯中，加入HCl的乙酸乙酯溶液，析出沉淀，抽滤，得到原人参二醇缬氨酸衍生物盐酸盐。

本发明公开了原人参二醇衍生物能提高单克隆抗体PD-1/PDL-1的抑瘤效果。

本发明同时发现所述原人参二醇衍生物在小鼠体内具有明显的抑瘤效果，与PD1/PDL1联用时抑瘤效果显著增加。