[发明专利]人吡咯林-5-羧酸还原酶作为制备治疗皮肤创伤药物的应用在审
申请号: | 202010393161.7 | 申请日: | 2020-05-11 |
公开(公告)号: | CN111529694A | 公开(公告)日: | 2020-08-14 |
发明(设计)人: | 孟照辉;胡伟;叶雨佳;万雯;李瑞 | 申请(专利权)人: | 昆明医科大学第一附属医院 |
主分类号: | A61K38/44 | 分类号: | A61K38/44;A61P17/02;A01K67/02 |
代理公司: | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人: | 赛晓刚 |
地址: | 650032 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 吡咯 羧酸 还原酶 作为 制备 治疗 皮肤 创伤 药物 应用 | ||
1.人吡咯林-5-羧酸还原酶作为制备治疗皮肤创伤药物的应用。
2.根据权利要求1所述的人吡咯林-5-羧酸还原酶作为制备治疗皮肤创伤药物的应用,其特征在于:所述的人吡咯林-5-羧酸还原酶(P5CR)的制备方法如下:
(1)将P5CR置冰上20分钟,常温下放置1小时,30摄氏度温箱30分钟。
(2)缓冲液(20mMCAPS,0.5Msodium chloride,PH9.4):常温下放置3-4小时,30摄氏度温箱30分钟。
(3)用缓冲液将P5CR稀释至终浓度0.0125mg/ml,配好后置于4摄氏度冰箱保存。
(4)还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)放于冰上化冻,常温下放置半小时,加入缓冲液稀释的P5CR中(按P5CR:NADPH=100:1的比例加入),配好后置于4摄氏度冰箱保存。
3.根据权利要求1所述的人吡咯林-5-羧酸还原酶作为制备治疗皮肤创伤药物的应用,其特征在于:所述的皮肤创伤模型的建立方法如下:
(1)将36只12周龄(200~250g)的雄性清洁级Spargue-Dawley(SD)大鼠随机分为2组。
(2)实验前一天将2组大鼠后背部剃毛,然后采用8%硫化钠溶液脱毛,脱毛范围为背部两侧4cm,24小时后确认脱毛区域无损伤。
(3)实验时大鼠用3%戊巴比妥钠(50mg/Kg)腹腔注射麻醉。
(4)麻醉起效后,用70%乙醇消毒两遍,取一厚纱布,中间剪一大小2.5*2.5cm的孔,纱布浸水后置于脱毛区,沿孔在大鼠两侧背部对称部位各制造一2.5*2.5cm大小的全层皮肤创面。
(5)造模后大鼠单笼喂养,自由进食、饮水。
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