[发明专利]检测头孢克肟聚合物杂质的方法

说明书

本发明涉及药物质量检测技术领域，特别涉及检测头孢克肟聚合物杂质的方法。该方法包括使用高效液相色谱法检测，所述高效液相色谱法的检测条件包括：流动相：由流动相A和流动相B组成，其中，流动相A为甲酸溶液，流动相B为乙腈、甲醇或乙腈‑甲醇；流动相A和流动相B的体积比为20～95:80～5。本发明提供的检测头孢克肟聚合物杂质的方法能有效检测头孢克肟聚合物杂质，解决原检测方法专属性差，检测到的杂质绝大部分不是聚合物杂质的问题。

技术领域

本发明涉及药物质量检测技术领域，特别涉及检测头孢克肟聚合物杂质的方法。

背景技术

头孢克肟(Cefixime)属于β-内酰胺类抗生素，是第三代头孢菌素类抗生素，其化学名称为：(6R，7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-4-噻唑基)-2-(羧甲氧亚氨基)乙酰氨基]-8-氧代-3-乙烯-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸三水合物；具有半衰期长、高效低毒、体内分布广、组织穿透性好等特点。

头孢菌素类抗生素中的聚合物杂质的来源可分为两类：外源性杂质和内源性杂质。外源性杂质一般来源于发酵工艺，为蛋白、多肽、多糖等杂质与抗生素结合的杂质；内源性杂质系指抗生素药物自身聚合产物，聚合物既可来自生产过程，又可在储存过程中形成。头孢菌素的聚合反应包括只依赖于母核的N型聚合反应和侧链参与的L型聚合反应，固体状态下头孢菌素类产品的聚合速度与含水量和贮存温度关系密切。目前，对于头孢菌素类抗生素中的聚合物杂质的检测多采用凝胶色谱法进行检测分析，凝胶色谱法又称为分子排阻色谱法，主要是利用分子筛机制，分子质量较小的药物分子进入凝胶孔隙内部，保留时间较长，而分子质量较大的聚合物杂质被排阻在凝胶孔隙之外，保留时间较短，较早被洗脱，从而与药物分子分离。对于头孢克肟原料药和制剂中聚合物杂质的测定，各国药典均无记载。现有技术中，赵晓东等学者(赵晓冬,傅蓉,陆军,等.分子排阻色谱法测定头孢克肟聚合物[J].中国药师,2011,14(1):61-63.)建立了分子排阻法分析头孢克肟高分子聚合物的方法，采用SephadexG10色谱柱(300mm×16mm，40～120μm)，流动相A为0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)，流动相B为超纯水，流速1.5mL/min，检测波长为254nm。结果显示，头孢克肟在5～80mg/mL的范围内与头孢克肟高分子聚合物的峰面积呈良好的线性关系(r＝0.9993)，头孢克肟在5～400μg/mL的范围内与头孢克肟缔合物的峰面积也呈良好的线性关系(r＝0.9997)。然而，从色谱图上可以明显看出，头孢克肟高聚物的峰型较差。申请人在早期也对头孢克肟聚合物杂质的检测方法进行了研究，采用传统的凝胶色谱法，所用色谱柱为TSKgel G2000 SWXL 7.8mm*30cm*5μm，色谱条件：HPLC-UV，波长：254nm，流速：0.8mL/min，流动相：pH7.0 0.005mol/L磷酸盐缓冲液[0.005mol/磷酸氢二钠溶液－0.005mol/L磷酸二氢钠溶液(61：39)]-乙腈(95:5)，进样量：10μL，供试品浓度：0.5mg/ml，稀释液：水，对照或标准溶液：10μg/ml，计算方法：外标法，运行时间：20min，杂质限度控制：总杂≤1.0％。通过分段收集高比例有机相梯度洗脱方法分离的含不同杂质的洗脱液，在凝胶色谱柱法中进行定位，发现在主成分头孢克肟出峰前洗脱出来的理论上为高分子杂质，即头孢克肟聚合物的杂质，但绝大部分分子量与头孢克肟接近。表明凝胶色谱法测定头孢克肟聚合物的专属差。可见，对于头孢克肟聚合物的测定方法需要重新探索开发。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提供了一种稳定性高、专属性好、可以对多种杂质有效分离进行定性定量分析的检测头孢克肟聚合物杂质的方法。

本发明的技术方案如下文所示。

本发明一方面提供了检测头孢克肟聚合物杂质的方法，包括使用高效液相色谱法检测头孢克肟聚合物杂质的步骤，所述高效液相色谱法的检测条件包括：

流动相：由流动相A和流动相B组成，其中，流动相A为甲酸溶液，流动相B为乙腈、甲醇或乙腈-甲醇；流动相A和流动相B的体积比为20～95:80～5。