[发明专利]SF3B1基因突变在泌乳素型垂体腺瘤辅助诊断中的应用

权利要求书

1.检测SF3B1基因c.1874GA突变的产品在制备用于辅助诊断垂体腺瘤、区分SF3B1突变型和野生型垂体腺瘤、或预测垂体腺瘤是否恶性的试剂或试剂盒中的用途。

2.权利要求1所述的用途，其中，所述垂体腺瘤为泌乳素型垂体腺瘤；

优选地，所述泌乳素型垂体腺瘤是耐药型泌乳素型垂体腺瘤；

优选地，所述耐药为溴隐亭和/或卡麦角林的耐药。

3.权利要求1或2所述的用途，其中，所述产品包含通过PCR技术检测所述SF3B1基因c.1874GA突变的试剂；

优选地，所述产品包含PCR扩增反应试剂混合液、针对SF3B1基因c.1874GA突变的引物对以及突变型等位基因探针；优选地，所述PCR扩增反应试剂混合液包含TaqDNA聚合酶、dNTP混合液、MgCl₂溶液、荧光定量PCR反应缓冲液和去离子水；

优选地，所述产品还包含野生型等位基因探针；

优选地，所述PCR为数字PCR或荧光定量PCR(qPCR)。

4.权利要求1-3中任一项所述的用途，其中，所述探针是TaqMan MGB探针，更优选地，所述TaqMan MGB探针的5'末端标记了荧光报告基团，3'末端标记了非荧光淬灭基团MGB；优选地，所述荧光报告基团是FAM或HEX荧光报告基团。

5.权利要求1-4中任一项所述的用途，其中，所述SF3B1基因的野生型基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；

优选地，所述引物对中的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述引物对中的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；

优选地，所述突变型等位基因探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；优选地，所述野生型等位基因探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。

6.权利要求1-6中任一项所述的用途，其中，所述突变型等位基因探针的结构如下：

HEX-5'-ATGTCCATAACACAAC-3'-MGB；

优选地，所述野生型等位基因探针的结构如下：

FAM-5'-AGTATGTCCGTAACACA-3'-MGB。

7.检测SF3B1蛋白R625H突变的产品在制备用于辅助诊断垂体腺瘤、区分SF3B1突变型和野生型垂体腺瘤、或预测垂体腺瘤是否恶性的试剂或试剂盒；

优选地，所述垂体腺瘤为泌乳素型垂体腺瘤。

8.权利要求7所述的用途，其中，所述产品包含抗体和/或蛋白质芯片；

优选地，所述SF3B1蛋白的野生型蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

9.一种检测SF3B1基因c.1874GA突变的引物，其中，其包含正向引物和反向引物；所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述引物对中的反向引物的核苷酸序列如SEQID NO:4所示。

10.一种辅助诊断垂体腺瘤、区分SF3B1突变型和野生型垂体腺瘤、或预测垂体腺瘤是否恶性的试剂盒，所述试剂盒包含针对SF3B1基因c.1874GA突变的引物对以及突变型等位基因探针；和/或所述试剂盒包含检测SF3B1蛋白R625H突变的抗体和/或蛋白质芯片；

优选地，所述垂体腺瘤为泌乳素型垂体腺瘤；

优选地，所述试剂盒还包含PCR扩增反应试剂混合液；优选地，所述PCR扩增反应试剂混合液包含TaqDNA聚合酶、dNTP混合液、MgCl₂溶液、荧光定量PCR反应缓冲液和去离子水；

优选地，所述试剂盒还包含野生型等位基因探针；

优选地，所述探针是TaqMan MGB探针，更优选地，所述TaqMan MGB探针的5'末端标记了荧光报告基团，3'末端标记了非荧光淬灭基团MGB；优选地，所述荧光报告基团是FAM或HEX荧光报告基团；

优选地，所述SF3B1基因的野生型基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；

优选地，所述引物对中的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述引物对中的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；

优选地，所述突变型等位基因探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；优选地，所述野生型等位基因探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示；

优选地，所述突变型等位基因探针的结构如下：

HEX-5'-ATGTCCATAACACAAC-3'-MGB；

优选地，所述野生型等位基因探针的结构如下：

FAM-5'-AGTATGTCCGTAACACA-3'-MGB；

优选地，所述SF3B1蛋白的野生型蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。