[发明专利]一种血样中五种抗肿瘤药物的富集检测方法及应用

说明书

本发明公开了一种血样中五种抗肿瘤药物的富集检测方法及应用，该方法用碱溶液对血样进行PH调节后，采用具有C8(C18)和阴离子交换能力的混合模式填料对目标物进行富集，再使用液相色谱串联质谱进行分析，通过内标法建立标准曲线计算血样中药物浓度，可实现同时测定涉及三种结构类型的抗肿瘤药物浓度。本方法具有高通量、快捷性的同时，还表现出提取回收率高、无基质效应的优点，满足多种质谱设备的定量需求，可应用于临床上此五种药物的血药浓度监测。

技术领域

本发明属于检验分析技术领域，具体涉及甲氨蝶呤、紫杉醇、多西他赛、伊马替尼、吉 非替尼五种抗肿瘤药物的富集检测方法，以及该方法在治疗药物浓度监测中的应用。

技术背景

抗肿瘤药物治疗是癌症常用治疗方法之一。大部分的抗肿瘤药物治疗指数低，不良反应 多，个体间药代动力学差异较大，同时肿瘤药物间联合用药情况比较普遍，可能存在药物药 物相互作用，影响药物的吸收和代谢。

治疗药物浓度监测(Therapeutic drug mornitoring,TDM)是以药代动力学原理为指导， 分析测定药物在血液中的浓度，使临床给药方案个体化，以提高疗效，避免或减少毒副反应。 因此，对抗肿瘤药物开展TDM工作，可针对患者的个体化差异，指导合理用药，实现临床 安全、有效、合理的用药。

TDM临床应用的前提条件是具有相对明确的量效(毒)关系，即建立血药浓度(或AUC、 峰谷浓度)与疗效、毒性之间的关系，临床使用的抗肿瘤药物众多，经实地和文献调研发现 甲氨蝶呤、紫杉醇、多西他赛、伊马替尼、吉非替尼五种临床常用的抗肿瘤药物，具有比较 明确的血药浓度(或AUC、峰谷浓度)与疗效、毒性间的关系，临床监测需求高。甲氨蝶呤广泛应用于骨肉瘤、儿童急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤，是肿瘤领域公认最需要做TDM的药物。美国食品药品监督管理局(FDA)指出：MTX体内正常清楚浓度为 24h≤10μmol/L，48h≤1μmol/L和72h≤0.2μmol/L。(FDA.FDA Approved Product:MethotrexateInjection,USP drugs.)；紫杉醇和多西他赛均是紫杉烷类抗肿瘤药物。紫杉醇(paclitaxel)是 妇科卵巢癌、乳腺癌和非小细胞肺癌的一线用药，其血药浓度t_c≥0.05μmol/L的是临床结局 的良好预测指标(JOERGER M,HUITEMA A D,RICHEL D J,et al.ClinCancer Res,2007, 13(21):6410-6418)。多西他赛主要用于乳腺癌、非小细胞肺癌和前列腺癌等的治疗，其AUC 是评价药物不良反应的指标(王晶，李雅倩等；中国临床药理学杂志，2018，34(24)：2889-2893)； 伊马替尼和吉非替尼为靶向酪氨酸激酶抑制药(TKIs)，伊马替尼为费城染色体阳性慢性粒 细胞白血病(CML)的一线治疗药物，当伊马替尼血中浓度达到1000ng/mL可以获得更 好的治疗效果；吉非替尼用于非小细胞型肺癌治疗中，其推荐的有效血药浓度为200ng/mL (Yu,H.,Steeghs,N.,Nijenhuis,C.M.,et al.ClinicalPharmacokinetics,2014，53(4),305–325)。 故建立一种可同时检测甲氨蝶呤、紫杉醇、多西他赛、伊马替尼、吉非替尼五种药物的血药 浓度方法，对其合理用药十分必要。