[发明专利]一种含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球及其制备方法

权利要求书

1.一种含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球，其特征在于，所述缓释微球为含未成熟树突状细胞外泌体的海藻酸钙微球。

2.根据权利要求1中所述的含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球，其特征在于，所述缓释微球为规则球形结构。

3.一种如权利要求1-2任一项所述的含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，未成熟树突状细胞外泌体的制备：

S1获取骨髓树突状细胞，在含有粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白介素4的培养液中培养；

S2培养完成后，收集细胞培养液，然后对其进行差速超速离心；

S3离心完成后，倒掉上清，用PBS重悬沉淀，然后再次离心，倒掉上清，用PBS重悬沉淀，便获得未成熟树突状细胞外泌体溶液；

步骤二，缓释微球的制备：

S1按照体积份数量取所述未成熟树突状细胞外泌体溶液和海藻酸钠溶液，充分搅拌均匀得到外泌体海藻酸钠悬液；

S2称取氯化钙配制为浓度为1mol/l的固化液；

S3将所述外泌体海藻酸钠悬液装入静电喷雾机中，设置所述静电喷雾机的运行参数并启动，喷口处喷洒出喷雾微滴分散于所述固化液，便得到所述缓释微球。

4.根据权利要求3所述的含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球的制备方法，其特征在于，所述差速超速离心的运行参数为：300g，10min；2000g，10min；10000g，30min；100000g，70min。

5.根据权利要求3所述的含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球的制备方法，其特征在于，步骤一S3中离心的参数为100000g，70min。

6.根据权利要求3所述的含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球的制备方法，其特征在于，所述静电喷雾机的运行参数为：电压为14-16kv，推注泵的速度为0.5-0.7ml/min。

7.根据权利要求6所述的含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球的制备方法，其特征在于，所述静电喷雾机的运行参数为：电压为15kv，推注泵的速度为0.6ml/min。

8.根据权利要求3所述的含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球的制备方法，其特征在于，所述未成熟树突状细胞外泌体溶液的浓度为100μg/ml。

9.根据权利要求3所述的含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球的制备方法，其特征在于，所述海藻酸钠溶液的浓度为0.8-1.2％。

10.根据权利要求3所述的含未成熟树突状细胞外泌体的缓释微球的制备方法，其特征在于，所述未成熟树突状细胞外泌体溶液和海藻酸钠溶液的体积比为：(3-8)：(92-97)。