[发明专利]一种替丁类药物中NDMA含量的检测方法

说明书

本发明公开了一种替丁类药物中NDMA含量的检测方法，采用液相色谱质谱联用检测，包括以下步骤：(1)将替丁类药物样品用液相色谱进行分离；其中，液相色谱采用亲水作用色谱柱，柱前流动相中不加酸；(2)将经液相色谱分离的样品结合质谱进行检测NDMA含量。本发明采用的亲水作用色谱分析方法来分离替丁类成分和NDMA，在柱前流动相中不加酸，使替丁和NDMA维持非离子型状态而达到分离，使两者分离时间相差12‑13min，因此，能够完全去除替丁类成分对NDMA的干扰，定量结果准确。本发明使用电喷雾离子化结合串联质谱，ESI为低温质谱，且质谱部分为非高分辨，造价成本相对低，因此应用推广性更强，转化应用前景强。

技术领域

本发明属于分析测试领域，尤其涉及一种检测替丁类药物中NDMA含量的方法。

背景技术

尼扎替丁为一种在临床上广泛用于治疗高胃酸分泌疾病的药物，是第三代新型H2-受体拮抗剂，与雷尼替丁相似，此类药物中也被检出含有不安全水平的致癌物质NDMA。NDMA，中文全名为N-亚硝基二甲胺，已确定是一种遗传毒性杂质，该物质可在很低浓度时造成人体遗传物质DNA损伤，进而导致基因突变致使肿瘤发生。目前，FDA、EMA、NMPA等药品监管部门发布的药物原料及制剂中NDMA杂质的检测方法主要为：GC-MS(气相色谱质谱法)、LC-APCI-MS/MS(液相色谱-大气压化学电离串联质谱法)、LC-HRMS(液相色谱-高分辨质谱法)等。对于替丁类药物的分析，因为气相色谱法的高温进样造成药物结构中的硝基和二甲胺从母核解离，再结合生成新的NDMA而出现假阳性结果，因此GC法无法在替丁类药物测定中使用；液相-质谱法目前采用的是反相液相色谱与APCI(大气压化学电离)结合用串联质谱进行检测，或与ESI(电喷雾电离)结合HRMS(高分辨质谱)进行检测。两种方式中的一个共性问题在于反相分离时，替丁类成分与NDMA的分离度有限。为促进后续的电离效率，流动相中添加的助电离剂(有机酸)也进一步减小了成分的分离效果。而且，由于APCI为高温离子源，亦会导致药物自身热裂解产生新的NDMA与样品中残留的NDMA重叠，进而出现假阳性结果，另外，HRMS仪器造价十分昂贵，很大程度上限制了LC-APCI-MS/MS和LC-HRMS的适用性。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种仪器造价相对低、应用推广性更强的、灵敏度高、定量结果准确的检测尼扎替丁原料或其制剂中NDMA含量的方法。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为：

一种替丁类药物中NDMA含量的检测方法，采用液相色谱质谱联用检测，包括以下步骤：

(1)将替丁类药物样品用液相色谱进行分离；

其中，液相色谱采用亲水作用色谱柱，柱前流动相(进入色谱柱的流动相为柱前流动相)中不加酸；

(2)将经液相色谱分离的样品结合质谱进行检测NDMA含量。

上述的检测方法，优选的，步骤(2)中，质谱分析采用ESI电喷雾离子源质谱。ESI电喷雾离子源质谱的离子源为低温离子源，且质谱部分为非高分辨，造价成本相对低，因此应用推广性更强。

上述的检测方法，优选的，步骤(1)中，液相色谱分析过程中柱前流动相为：流动相A为纯水，流动相B为98％-50％乙腈。流动相A和流动相B可以互换。本发明的申请人发现通过选择98％-50％乙腈水作为流动相，可以让尼扎替丁在亲水作用色谱柱上保留时间更长，从而与NDMA达到完全分离。

上述的检测方法，优选的，步骤(1)中，流动相A与流动相B的体积比为1:1。

上述的检测方法，优选的，步骤(1)中，色谱柱选择Waters亲水柱、赛默飞亲水柱、安捷伦亲水柱、酰胺柱亲水色谱柱中的任一种。