[发明专利]一种消化道腺病毒的PCR荧光检测试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 202010356222.2 | 申请日： | 2020-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN111411175B | 公开（公告）日： | 2020-12-25 |
| 发明（设计）人： | 马东礼;刘孝荣;邢志浩;姜含芳;邓栩文 | 申请（专利权）人： | 深圳市儿童医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 李兴林 |
| 地址： | 518000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 消化道 病毒 pcr 荧光 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种消化道腺病毒的PCR荧光检测试剂盒，包括特异性引物和探针以及PCR反应试剂，所述特异性引物和探针是由人类腺病毒40型及41型全基因组的共同序列和内参片段的特异性引物和探针组成，其特征在于，所述特异性引物和探针序列如下：
目的片段的上游引物SEQ ID NO.1：5’-TTCACCTCTGTTTGCTGCAC-3’；
目的片段的下游引物SEQ ID NO.2：5’-AGGTAGTCCGCAGTTTGGAA-3’；
目的片段的探针SEQ ID NO.3：
5’-FAM-TGCCATCTGCAGCATTGCCACT-TAMRA-3’；
内参片段的上游引物SEQ ID NO.4：5’-GGCATGTGGAGGAAGGTGGT-3’；
内参片段的下游引物SEQ ID NO.5：5’-CCATGGACTGGCTCTCCGTT-3’；
内参片段的探针SEQ ID NO.6：
5’-HEX-ACGCAGCCCTGCTTCGTTCGCCG-TAMRA-3’。
2.如权利要求1所述的消化道腺病毒的PCR荧光检测试剂盒，其特征在于，PCR反应试剂12.5mM Tris-HCl,pH9.0、50mM KCl、0.13％X-100、3.13mM MgCl2、0.45mM dATP、0.45mM dGTP、0.45mM dCTP、0.79mM dUTP、两对引物SEQ ID NO.1和2、4和5，两个探针SEQID NO.3、6共同组成PCR反应液A，其中引物浓度都为0.3-0.7μM，探针浓度都为0.14-0.16μM；PCR反应试剂20mM Tris-HCl、100mM KCl、0.1mM EDTA、1mM DTT、50％Glycerine、0.5％20、1-3U/μL热启动酶、0.1-0.3U/μL UNG酶共同组成PCR反应液B。
3.如权利要求1或2所述的消化道腺病毒的PCR荧光检测试剂盒，其特征在于，还包括阴性质控品和阳性质控品。
4.如权利要求3所述的消化道腺病毒的PCR荧光检测试剂盒，其特征在于，所述阴性质控品为生理盐水。
5.如权利要求3所述的消化道腺病毒的PCR荧光检测试剂盒，其特征在于，所述阳性质控品为克隆有消化道腺病毒基因的工程菌悬液。
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