[发明专利]一种cAMP荧光探针G-Flamp1的应用有效

专利信息
申请号: 202010354936.X 申请日: 2020-04-29
公开(公告)号: CN113567402B 公开(公告)日: 2023-06-06
发明(设计)人: 王亮;储军 申请(专利权)人: 中国科学院深圳先进技术研究院
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64
代理公司: 北京市诚辉律师事务所 11430 代理人: 李玉娜
地址: 518055 广东省深圳*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 camp 荧光 探针 flamp1 应用
【权利要求书】:

1.一种cAMP荧光探针G-Flamp1在单光子成像中的应用,所述G-Flamp1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,其特征在于,所述单光子的激发波长为430-470 nm。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述单光子的激发波长为430-450 nm。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述单光子的激发波长为450 nm。

4.一种cAMP荧光探针G-Flamp1在双光子成像中的应用,所述G-Flamp1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,其特征在于,所述双光子的激发波长为880-920 nm。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述双光子的激发波长为900-920 nm。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述双光子的激发波长为900 nm、920 nm。

7.一种cAMP荧光探针G-Flamp1在活细胞内cAMP信号检测中的应用,其特征在于,所述G-Flamp1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述信号检测中所采用的单光子的激发波长为430-470 nm;双光子的激发波长为880-920 nm。

8.一种活细胞中cAMP荧光成像检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)将cAMP荧光探针G-Flamp1表达在哺乳动物细胞中,所述G-Flamp1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;

2)利用单光子荧光显微镜或者双光子显微镜进行成像分析,检测探针荧光的强度变化,所述成像分析中所采用的单光子的激发波长为430-470 nm,双光子的激发波长为880-920 nm。

9.如权利要求8所述的一种活细胞中cAMP荧光成像检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)将cAMP荧光探针G-Flamp1表达在哺乳动物细胞中,所述G-Flamp1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;

2)刺激哺乳动物细胞升高或者降低其胞内cAMP浓度;

3)利用单光子荧光显微镜或者双光子显微镜进行成像分析,检测探针荧光的强度变化,所述成像分析中所采用的单光子的激发波长为430-470 nm,双光子的激发波长为880-920 nm。

10.一种非疾病诊断和治疗目的的cAMP荧光探针G-Flamp1在活体脑片内cAMP信号检测中的应用,其特征在于,所述G-Flamp1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述信号检测中所采用的单光子的激发波长为430-470 nm;双光子的激发波长为880-920 nm。

11.一种非疾病诊断和治疗目的的活体脑片中cAMP荧光成像检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)在哺乳动物的脑区注射含G-Flamp1探针基因的病毒载体,所述G-Flamp1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;

2)待G-Flamp1探针在脑区神经元中表达后,制备活体脑片;

3)利用单光子荧光显微镜、双光子荧光显微镜或者显微内镜进行成像分析,所述成像分析中所采用的单光子的激发波长为430-470 nm,双光子的激发波长为880-920 nm。

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